Anticorps polyclonal de lapin anti-ICOS/CD278 pour WB, IF/ICC, ELISA - Q9Y6W8

Spécifications et paramètres clés du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'ICOS/CD278

• L'ICOS (Inducible T-cell costimulator), également connu sous le nom d'AILIM et de CD278, est un récepteur stimulateur exprimé sur les cellules T activées. Il appartient à la famille CD28 des molécules de costimulation immunitaires et contient un domaine immunoglobuline.
• L'ICOS joue un rôle crucial dans les réponses des cellules T en se liant à son ligand ICOSL sur les CPA, délivrant des signaux de costimulation qui améliorent la prolifération des cellules T, la sécrétion de cytokines (par exemple, IL10) et l'aide à la sécrétion d'anticorps par les cellules B. Références connexes : PMID:9930702, PMID:33033255
• Il est critique pour la différenciation des cellules T folliculaires régulatrices lors de défis immunitaires tels que l'infection virale, agissant via la signalisation PI3K et la modulation du flux de calcium induit par le TCR. Références connexes : PMID:27135603, PMID:30523347
• L'ICOS empêche l'apoptose des cellules T pré-activées et est essentiel pour les interactions efficaces entre les cellules T et B et le commutateur de classe médié par CD40 des isotypes d'immunoglobulines.
• Au niveau subcellulaire, l'ICOS est localisé à la membrane cellulaire et peut également être sécrété.
• Il est fortement exprimé sur les cellules T des amygdales dans les centres germinatifs, avec des niveaux plus faibles dans le thymus, le poumon, le ganglion lymphatique et les leucocytes du sang périphérique, montrant un motif d'expression spécifique aux tissus.
• Les modifications post-traductionnelles incluent la glycosylation et la formation de ponts disulfures, contribuant à sa stabilité structurelle.
• L'épissage alternatif peut générer plusieurs isoformes, ajoutant une diversité fonctionnelle.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène correspond au domaine extracellulaire (aa 21-140) de l'ICOS humain, qui partage une forte homologie avec la souris et le rat, soutenant la réactivité croisée.
• Pour le Western blot, une bande autour de 23 kDa (apparaissant parfois comme un doublet en raison de la glycosylation) est attendue ; envisagez d'utiliser des lysats de contrôle positif à partir de cellules T activées.
• En immunofluorescence/ICC, une perméabilisation peut être nécessaire pour la détection intracellulaire ; validez la coloration dans les lignées de cellules T telles que Jurkat.
• Pour ELISA, l'anticorps peut être utilisé comme anticorps de capture ou de détection ; envisagez de l'associer à d'autres anticorps ICOS ou à des protéines de fusion ICOSL-Fc.
• Incluez toujours des témoins négatifs appropriés (par exemple, cellules déficientes en ICOS ou peptide bloquant) pour confirmer la spécificité.
• Envisagez de tester une gamme de dilutions commençant à 1:500 pour WB et 1:50 pour IF, car les anticorps polyclonaux peuvent varier d'un lot à l'autre.

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