Anticorps polyclonal anti-HuR/ELAVL1 pour WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q15717

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de HuR/ELAVL1

• HuR/ELAVL1 est une protéine de liaison à l'ARN qui reconnaît spécifiquement les éléments riches en AU (AREs) et les motifs poly-U dans les 3'-UTR d'ARNm tels que FOS et IL3, les stabilisant et améliorant leur traduction. Elle se lie préférentiellement à la séquence 5'-UUUU[AG]UUU-3'. Références associées : PMID:14517288, PMID:18285462, PMID:31358969, PMID:14731398, PMID:17632515, PMID:8626503
• Lors de la différenciation des cellules souches embryonnaires, HuR se lie de préférence aux ARNm non méthylés en m6A, les stabilisant pour promouvoir le programme de différenciation (Par similitude).
• HuR se lie également à l'ARNm MYC modifié par m6A, contribuant à la stabilité de l'oncogène MYC et à la capacité proliférative (PubMed:32245947). Références associées : PMID:32245947
• Elle augmente la stabilité de l'ARNm de la leptine via la liaison aux ARE, la reliant au métabolisme énergétique (PubMed:29180010). Références associées : PMID:29180010
• HuR fait la navette entre le noyau et le cytoplasme, et se localise dans les granules de stress et les corps P en réponse au stress cellulaire.
• Exprimée de manière ubiquitaire, HuR est détectée dans le cerveau, le foie, le thymus et les muscles.
• Les modifications post-traductionnelles, y compris la phosphorylation, l'acétylation et la méthylation, régulent la fonction et la distribution subcellulaire de HuR.

Guide expérimental et conseils techniques

• Pour le WB, utilisez des lysats cellulaires totaux de lignées cellulaires humaines ou murines exprimant HuR (par exemple, HeLa, HEK293). La taille de bande attendue est d'environ 36 kDa. Envisagez une pré-absorption avec le peptide immunisant pour confirmer la spécificité.
• Pour l'IHC-P, validez les conditions de récupération antigénique (tampon citrate ou EDTA) sur des coupes de tissus humains ou murins connus pour exprimer HuR, comme le cerveau ou le foie. Une étape de blocage est recommandée pour réduire le bruit de fond.
• Pour l'IF/ICC, optimisez les protocoles de fixation (par exemple, PFA 4%) et de perméabilisation (par exemple, Triton X-100 0,1%). La navette nucléo-cytoplasmique de HuR peut être affectée par le traitement cellulaire ; incluez des témoins non traités.
• Pour l'ELISA, l'anticorps peut être utilisé pour les formats direct et sandwich. Associez-le à un anticorps de détection reconnaissant un épitope distant pour une sensibilité optimale.
• Comme HuR est soumise à des modifications post-traductionnelles, tenez compte du contexte biologique lors de l'interprétation des résultats ; les formes modifiées peuvent migrer différemment en SDS-PAGE.

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