Anticorps Polyclonal Anti-Huntingtine pour WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P42858

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la Huntingtine

• La protéine Huntingtine (HTT), également appelée protéine HD ou IT15, est codée par le gène HTT et constitue le sujet principal de la recherche sur la maladie de Huntington.
• La Huntingtine est une grande protéine de 348 kDa qui pourrait jouer un rôle dans le transport médié par les microtubules ou la fonction vésiculaire.
• Elle favorise la formation de vésicules autophagiques, contribuant aux voies cellulaires de dégradation et de recyclage.
• Sa localisation subcellulaire inclut le cytoplasme, le noyau, les endosomes précoces et les autophagosomes, ce qui indique un trafic dynamique.
• Dans le cerveau, la Huntingtine est fortement exprimée dans le cortex cérébral, le striatum, le cortex cérébelleux et la formation hippocampique ; on la trouve également dans les fibres nerveuses, les varicosités et les terminaisons nerveuses.
• Les modifications post-traductionnelles incluent l'acétylation, la myristoylation, la phosphorylation et l'ubiquitination, qui pourraient réguler sa fonction et ses interactions.
• Les mutations du gène HTT impliquant une expansion de triplets CAG causent la maladie de Huntington, une maladie neurodégénérative.

Conseils expérimentaux et techniques

• L'immunogène correspond aux acides aminés 435-635 de la Huntingtine humaine (NP_002102.4). Pour le Western blot, notez le poids moléculaire élevé (~348 kDa) ; envisagez d'utiliser des gels de polyacrylamide à faible pourcentage et des temps de transfert prolongés pour une détection optimale.
• En tant qu'anticorps polyclonal, il peut reconnaître plusieurs épitopes ; cela peut être avantageux pour détecter les formes de huntingtine pleine longueur et tronquées, mais une validation spécifique est recommandée pour chaque application.
• Pour IHC-P et IF/ICC, utilisez des coupes de cerveau congelées fraîches ou incluses en paraffine comme contrôle positif, compte tenu de la forte expression dans le système nerveux central. Validez le profil de coloration par rapport aux distributions subcellulaires connues.
• L'anticorps présente une réactivité croisée avec des échantillons de souris et de rat, mais les niveaux d'expression de l'antigène et la stabilité de la protéine peuvent varier selon les tissus et les espèces ; réalisez des essais pilotes pour confirmer l'adéquation.
• Pour l'ELISA, optimisez l'antigène de revêtement et la dilution de l'anticorps pour obtenir une gamme de détection linéaire.
• Incluez toujours des contrôles négatifs (par exemple, tissu de modèles knock-out HTT si disponibles) et vérifiez la spécificité avec des lysats positifs et négatifs connus.

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