Anticorps monoclonal ABflo 488 anti-RANKL/CD254 humain pour cytométrie en flux (intracellulaire) - O14788

Spécifications et paramètres clés du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de RANKL/CD254

• RANKL (TNFSF11, TRANCE, OPGL, ODF, CD254) est un membre de la superfamille des ligands du facteur de nécrose tumorale (TNF), exprimé à la fois sous forme membranaire et sous forme de cytokine soluble.
• Il agit comme facteur clé de différenciation et d'activation des ostéoclastes en se liant à TNFRSF11A/RANK et TNFRSF11B/OPG, ce qui induit la translocation nucléaire de NFATC1 et l'expression de gènes spécifiques des ostéoclastes. Références associées : PMID:22664871
• Au-delà du remodelage osseux, RANKL stimule la prolifération des lymphocytes T médiée par les cellules dendritiques et peut réguler la communication entre lymphocytes T et cellules dendritiques lors des réponses immunitaires.
• Épissage alternatif et clivage protéolytique génèrent plusieurs isoformes, avec des poids protéiques observés de 27, 30 et 35 kDa qui reflètent des glysosylations et des traitements post-traductionnels variés.
• La localisation sous-cellulaire inclut la membrane cellulaire (protéine membranaire de type II à passage unique), le cytoplasme et une forme sécrétée, permettant à la fois une signalisation juxtacrine et paracrine.
• L'expression tissulaire est la plus élevée dans les ganglions lymphatiques périphériques, avec des niveaux plus faibles dans la rate, les leucocytes, la moelle osseuse, le cœur, le placenta, le muscle squelettique, l'estomac et la thyroïde.

Conseils expérimentaux et indications techniques

• L'immunogène correspond au domaine extracellulaire (aa 136–317), qui couvre la région de liaison au récepteur ; ce conjugué ABflo 488 est validé pour la cytométrie en flux intracellulaire et peut nécessiter l'utilisation de tampons de perméabilisation.
• Pour la détection de RANKL de surface sur cellules vivantes, la titration et les protocoles sans fixation doivent être optimisés indépendamment, car l'anticorps est produit contre une protéine recombinante et peut reconnaître à la fois les formes membranaire et soluble.
• Compte tenu de sa spécificité pour l'homme, utilisez des échantillons d'origine humaine (par ex. lymphocytes T activés, ostéoblastes, cellules de ganglions lymphatiques) et confirmez la réactivité croisée avec des témoins appropriés.
• L'ABflo 488 présente des propriétés spectrales similaires à l'Alexa Fluor 488 ; vérifiez la compatibilité du laser et des filtres (excitation ~488 nm, émission ~520 nm) pour une détection optimale du signal.

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