Anticorps monoclonal anti-humain LILRA2/CD85h pour IF/ICC, FC - Q8N149

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de LILRA2/CD85h

• LILRA2 (récepteur de type immunoglobuline de leucocyte, membre 2 de la sous-famille A), également appelé CD85h, ILT-1 et LIR-7, est une protéine membranaire de type I à passage unique appartenant à la superfamille des immunoglobulines. Plusieurs isoformes protéiques sont produites par épissage alternatif, avec des poids moléculaires rapportés d'environ 47 à 53 kDa.
• En tant que récepteur immunitaire inné, LILRA2 reconnaît spécifiquement les immunoglobulines tronquées en N-terminal qui sont générées par clivage protéolytique par diverses bactéries et champignons pathogènes, notamment L. pneumophila, M. hyorhinis, S. pneumoniae, S. aureus et C. albicans. Cette reconnaissance déclenche l'activation des neutrophiles et la libération de médiateurs inflammatoires par les monocytes et les éosinophiles. Références associées : PMID:12529506 PMID:27572839 PMID:22479404
• Le récepteur se lie à un sous-ensemble de molécules d'IgM, d'IgG3 et d'IgG4 clivées mais n'interagit pas avec l'IgA1 clivée ou les antigènes du CMH de classe I, indiquant une spécificité pour certaines immunoglobulines modifiées par des pathogènes. Références associées : PMID:27572839 PMID:19230061
• Après liaison du ligand dans les monocytes, LILRA2 régule à la baisse les réponses au lipopolysaccharide bactérien (LPS), probablement en réduisant l'expression et la signalisation de TLR4, et induit la sécrétion de CSF2, CF3, IL6, CXCL8 et CCL3. Références associées : PMID:22479404
• Dans les éosinophiles, l'activation du récepteur favorise la libération de RNASE2, IL4 et leucotriène C4, amplifiant davantage les cascades inflammatoires. Références associées : PMID:12529506
• LILRA2 est principalement détecté à la surface des monocytes sanguins périphériques, des neutrophiles, des basophiles et des éosinophiles, avec une expression très faible ou absente sur les lymphocytes T, les lymphocytes B, les cellules dendritiques et les cellules NK. Références associées : PMID:12529506 PMID:22479404 PMID:9548455
• La protéine est annotée avec plusieurs caractéristiques structurelles et fonctionnelles clés, notamment un peptide signal, des domaines de type immunoglobuline, des ponts disulfure, une glycosylation liée à l'azote et une nitration de la tyrosine ; une isoforme sécrétée a également été décrite.

Guide expérimental et conseils techniques

• Étant donné que l'immunogène couvre toute la région extracellulaire, l'anticorps est susceptible de reconnaître le LILRA2 natif exprimé en surface, ce qui le rend adapté à la coloration de cellules vivantes en cytométrie en flux et en immunofluorescence.
• Pour l'IF/ICC, les conditions de fixation et de perméabilisation appropriées doivent être optimisées pour préserver l'accessibilité de l'épitope, en particulier pour la détection intracellulaire ou liée à la membrane.
• Compte tenu du profil d'expression rapporté, envisagez d'inclure des contrôles appropriés en utilisant des types cellulaires avec une expression connue (par exemple, monocytes sanguins périphériques, neutrophiles) et ceux avec une expression faible/absente (par exemple, lymphocytes) pour vérifier la spécificité.
• Le fluorophore conjugué est compatible avec les canaux de détection standard de fluorescence rouge ; toujours protéger de la lumière pendant le traitement.
• Pour la FC, titrez l'anticorps pour déterminer la concentration de coloration optimale pour votre type d'échantillon spécifique afin de minimiser le bruit de fond et de maximiser le rapport signal/bruit.
• Comme l'anticorps n'est validé par le fournisseur que pour l'IF/ICC et la FC, les performances dans d'autres applications (par exemple, western blot) doivent être vérifiées indépendamment, surtout compte tenu des multiples isoformes et de la glycosylation potentielle de LILRA2.

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