Anticorps monoclonal anti-IL-6R/CD126 humain () pour la cytométrie en flux intracellulaire - P08887

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'IL-6R/CD126

• La sous-unité alpha du récepteur de l'interleukine 6 (IL-6R/CD126/gp80) est une glycoprotéine transmembranaire appartenant à la superfamille des immunoglobulines ; une forme soluble (sIL6R) est générée par épissage alternatif.
• Fait partie du récepteur de l'interleukine 6 : se lie à l'IL6 avec une faible affinité et nécessite une association avec IL6ST/gp130 pour la transduction du signal, régulant ainsi les réponses immunitaires, les réactions de phase aiguë et l'hématopoïèse (PubMed:28265003, PubMed:30995492, PubMed:31235509). Références associées : PMID:28265003, PMID:30995492, PMID:31235509
• L'IL6R lié à la membrane médie la « signalisation classique », qui est principalement régénératrice et anti-inflammatoire ; il favorise également la différenciation Th17 via une « signalisation en cluster » entre les cellules dendritiques et les cellules T.
• L'IL6R soluble agit comme un agoniste : le complexe IL6:sIL6R (hyper-IL6) permet une « trans-signalisation » sur les cellules dépourvues d'IL6R membranaire, favorise la production de VEGF et est à l'origine de propriétés pro-inflammatoires dans les maladies inflammatoires chroniques (PubMed:21990364, PubMed:12794819). Références associées : PMID:21990364, PMID:12794819
• Le sIL6R joue également des rôles protecteurs, étant nécessaire à la régénération du tissu hépatique après une lésion et à la régulation de l'homéostasie énergétique et du glucose dans le système nerveux central.
• Localisation subcellulaire : le récepteur pleine longueur est une protéine membranaire de type I à passage unique ; la forme soluble est sécrétée.
• Exprimé dans les cellules mononucléées du sang périphérique ; le sIL6R est détectable dans l'urine et le sérum, avec 1 à 20 % provenant de l'épissage alternatif (PubMed:28060820). Références associées : PMID:28060820
• Les modifications post-traductionnelles comprennent la glycosylation liée à l'azote (N-linked) et la formation de ponts disulfures au sein du domaine extracellulaire de type immunoglobuline.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène (aa 20-358) couvre l'intégralité du domaine extracellulaire ; l'anticorps peut reconnaître à la fois l'IL-6R lié à la membrane et le sIL6R soluble. Validez dans le système d'échantillonnage pertinent.
• Ce conjugué permet une détection directe en cytométrie en flux sans anticorps secondaire. Confirmez la compatibilité de l'instrument (excitation ~650 nm, émission ~665 nm) et réglez les contrôles de compensation.
• Pour le marquage intracellulaire, optimisez les conditions de fixation et de perméabilisation pour votre type cellulaire afin de maintenir l'accessibilité de l'épitope et de minimiser le bruit de fond.
• Utilisez des contrôles négatifs appropriés (par exemple, contrôle isotypique, cellules knockout/knockdown) pour confirmer la spécificité de votre essai.

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