Anticorps monoclonal anti-galectine-3 humaine pour cytométrie en flux (intracellulaire) - P17931

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de la galectine-3

• La galectine-3, codée par le gène LGALS3, est une protéine multifonctionnelle également connue sous les noms de lectine de 35 kDa, protéine de liaison aux glucides 35 (CBP35), protéine de liaison aux galactosides (GALBP), protéine de liaison aux IgE, L-31, protéine de liaison à la laminine, lectine L-29 et antigène Mac-2.
• Elle fonctionne comme une lectine spécifique du galactose qui se lie aux IgE et intervient dans les interactions avec les intégrines, contribuant à la migration des cellules endothéliales et à la différenciation des cellules épithéliales cylindriques au cours de l’embryogenèse.
• Dans le noyau, la galectine-3 agit comme un facteur d’épissage des pré-ARNm, tandis que dans le cytoplasme, elle participe à la reconnaissance des endomembranes endommagées et coordonne l’autophagie en recrutant ATG16L1 et BECN1 avec TRIM16.
• Elle joue un rôle essentiel dans les réponses inflammatoires aiguës, notamment l’activation et l’adhésion des neutrophiles, la chimioattraction des monocytes/macrophages, l’opsonisation des neutrophiles apoptotiques et l’activation des mastocytes.
• La protéine circule entre le cytoplasme, le noyau et l’espace extracellulaire, et est sécrétée par une voie non classique malgré l’absence de peptide signal.
• La galectine-3 subit des modifications post-traductionnelles telles que l’acétylation et la phosphorylation, et contient des ponts disulfure susceptibles de réguler son activité lectinique et sa stabilité.
• Elle est principalement exprimée dans l’épithélium colique, les macrophages activés et les membranes fœtales, ce qui souligne son importance dans la défense immunitaire et le remodelage tissulaire.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• Cet anticorps a été produit contre une protéine recombinante couvrant la galectine-3 humaine entière (aa 1–250) ; il devrait reconnaître les pools cytoplasmiques et nucléaires de la protéine.
• Pour la cytométrie en flux intracellulaire (FC intra), optimisez les protocoles de perméabilisation et de fixation afin de garantir l’accès de l’anticorps à la galectine-3 dans les différents compartiments subcellulaires.
• Comme la galectine-3 peut également être sécrétée, envisagez d’utiliser des inhibiteurs de sécrétion ou d’analyser les fractions extracellulaires si la protéine de surface ou libérée présente un intérêt ; des contrôles appropriés doivent être inclus.
• Validez la spécificité de la coloration à l’aide de lignées cellulaires avec invalidation ou extinction de la galectine-3, ou préincubez l’anticorps avec l’immunogène afin de confirmer la réduction du signal.
• La concentration de l’anticorps et les temps d’incubation peuvent nécessiter une titration pour votre système expérimental spécifique ; testez une gamme de dilutions afin d’obtenir un rapport signal/bruit optimal.

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