Anticorps Monoclonal Anti-Human FAP pour FC - Q12884

Spécifications et Paramètres Principaux du Produit

Contexte Biologique : Fonction et Localisation du FAP

• La prolyl endopeptidase FAP (également connue sous le nom de seprase, FAPalpha, DPPIV, SIMP) est une glycoprotéine de surface cellulaire et une sérine protéase qui existe sous forme d'un homodimère d'environ 170 kDa de monomères d'environ 88 kDa.
• La protéase présente une activité endopeptidase de clivage post-proline avec une préférence marquée pour les motifs Ala/Ser-Gly-Pro-Ser/Asn/Ala, ciblant des substrats tels que l'alpha-2-antiplasmine (SERPINF2) et SPRY2. Références connexes : PMID:14751930, PMID:16223769, PMID:16410248
• Elle possède également une activité dipeptidyl peptidase, hydrolysant les liaisons prolyl à deux résidus de l'extrémité N-terminale de substrats synthétiques (ex: Ala-Pro, Ile-Pro, Gly-Pro, Arg-Pro, Pro-Pro) et traitant des neuropeptides naturels, notamment NPY, PYY, la substance P et BNP. Références connexes : PMID:10347120, PMID:10593948, PMID:16175601, PMID:21314817
• Le FAP dégrade la gélatine et le collagène de type I dénaturé par la chaleur, mais ne clive pas les collagènes natifs ni plusieurs autres composants de la MEC comme la fibronectine et la laminine. Références connexes : PMID:10347120, PMID:10455171, PMID:12376466
• Sur la membrane plasmique, le FAP s'associe à DPP4, PLAUR ou aux intégrines pour médier la protéolyse péricellulaire de la MEC, favorisant ainsi l'adhésion, la migration et l'invasion cellulaires.
• Le FAP est ancré à la surface cellulaire et enrichi dans les protrusions membranaires (lamellipodes, invadopodes, replis) ; il se trouve également sous forme sécrétée et dans le cytoplasme.
• La protéine est exprimée dans les fibroblastes stromaux activés de divers tissus, y compris les plaies en cicatrisation, le foie fibrotique et les cancers épithéliaux, ainsi que dans les cellules de gliomes et de mélanomes. Elle est absente du foie normal.
• Deux isoformes (isoforme 1 et isoforme 2) sont produites par épissage alternatif, toutes deux étant détectées dans les lignées cellulaires de mélanomes, de carcinomes et de fibroblastes.

Guidance Expérimentale et Conseils Techniques

• Pour la cytométrie en flux, titrez l'anticorps pour déterminer la concentration de marquage optimale et incluez toujours des contrôles isotypiques appropriés.
• Il est connu que le FAP subit un clivage protéolytique et une glycosylation, ce qui peut entraîner plusieurs bandes (ex: ~27 kDa et ~87 kDa) lors de l'immunodétection. Validez les conditions de détection en utilisant un contrôle positif pertinent (ex: lignées cellulaires exprimant le FAP).
• Puisque le FAP est une protéine transmembranaire, des protocoles de marquage sur cellules vivantes peuvent être envisagés ; évitez les tampons de perméabilisation si vous ciblez des épitopes extracellulaires.
• Confirmez que les réglages du laser et des filtres du cytomètre sont compatibles avec l'(maxima d'excitation/émission ~590/617 nm).

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