Anticorps monoclonal anti-CD117/c-Kit humain pour cytométrie en flux - P10721

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de CD117/c-Kit

• CD117/c-Kit est une tyrosine kinase réceptrice de type III qui agit comme récepteur de surface cellulaire du facteur des cellules souches (KITLG/SCF) ; il est codé par le proto-oncogène KIT et est également connu sous les noms de récepteur du facteur de croissance des mastocytes/cellules souches, protéine du phénotype piebalde (PBT) et p145 c-kit.
• Lors de la liaison au ligand, KIT active plusieurs cascades de signalisation en aval, notamment les voies PI3K/AKT, RAS/RAF/MAPK et STAT, régulant la survie, la prolifération et la différenciation cellulaires dans les lignées hématopoïétiques, germinales et mélanocytaires.
• La protéine contient une région extracellulaire composée de cinq domaines de type immunoglobuline, une hélice transmembranaire unique et un domaine intracellulaire de tyrosine kinase, avec une épissure alternative documentée produisant plusieurs isoformes.
• KIT est essentiel au développement et au fonctionnement des mastocytes ; il est également indispensable à la gamétogenèse, son expression étant détectée dans les spermatogonies testiculaires, les cellules interstitielles de Leydig et les spermatozoïdes éjaculés. Références associées : PMID:20601678
• Au niveau subcellulaire, KIT se trouve principalement au niveau de la membrane cellulaire, mais peut également être détecté dans le cytoplasme après activation ou internalisation.
• Les modifications post-traductionnelles comprennent la glycosylation, la formation de ponts disulfure et l'ubiquitination, qui régulent sa stabilité et sa signalisation.
• La protéine a un poids moléculaire d'environ 109 à 110 kDa et appartient à la famille des récepteurs à activité tyrosine-protéine kinase, dotés de propriétés de liaison à l'ATP et aux métaux.
• Sur le plan clinique, les mutations de KIT sont associées au piébaldisme, à la mastocytose, aux tumeurs stromales gastro-intestinales et à d'autres tumeurs malignes, ce qui en fait une cible diagnostique et thérapeutique.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L'immunogène couvre les acides aminés 26 à 520, englobant l'intégralité du domaine extracellulaire du CD117/c-Kit humain. Cette conception peut augmenter la probabilité de reconnaître le récepteur natif présent à la surface des cellules vivantes, ce qui le rend adapté aux applications de cytométrie en flux.
• Lors de l'utilisation de cet anticorps conjugué à pour la cytométrie en flux, il est recommandé de réaliser une titration de l'anticorps afin de déterminer la concentration de marquage optimale pour votre type cellulaire et vos conditions expérimentales spécifiques.
• Incluez des contrôles d'isotype appropriés et des colorants de viabilité afin d'assurer une stratégie de gating précise des populations, en particulier lors de l'analyse de cellules souches hématopoïétiques ou de mastocytes rares.
• Validez les performances de l'anticorps dans votre matrice d'échantillon (par exemple, sang périphérique, moelle osseuse, lignées cellulaires) et envisagez d'utiliser des contrôles positifs et négatifs connus pour confirmer sa spécificité.

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