Anticorps monoclonal anti-humain CD116 pour cytométrie en flux - P15509

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de CD116

• CD116, la sous-unité alpha du récepteur du facteur de stimulation des colonies de granulocytes-macrophages (CSF2RA, également appelé CDw116), est un récepteur de faible affinité pour le GM-CSF qui médie la prolifération, la différenciation et l'activation des cellules hématopoïétiques.
• C'est une protéine membranaire de type I à passage unique qui transduit les signaux induits par le ligand par association avec la chaîne bêta commune (CSF2RB) pour former le complexe récepteur de haute affinité.
• Le récepteur se localise principalement sur la membrane cellulaire ; des isoformes solubles sont générées par épissage alternatif et clivage protéolytique, et il est également annoté comme sécrété.
• Plusieurs isoformes protéiques résultent de l'épissage alternatif et d'une glycosylation différentielle, ce qui explique la gamme de poids moléculaire observée de 26 kDa à 49 kDa.
• CD116 contient trois domaines extracellulaires de type fibronectine III, un motif conservé WSXWS et des ponts disulfures qui stabilisent sa structure, ce qui est confirmé par le mot-clé de structure 3D.
• Les modifications post-traductionnelles comprennent la glycosylation N-liée et la formation de ponts disulfures, qui sont essentielles pour un repliement correct et la liaison au ligand.
• Les variants génétiques de CSF2RA sont associés à des phénotypes pathologiques, dont la protéinose alvéolaire pulmonaire, comme indiqué par le mot-clé de variant pathologique.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène couvrant les acides aminés 23 à 320 du domaine extracellulaire assure la reconnaissance du CD116 natif à la surface cellulaire, ce qui rend l'anticorps adapté à la cytométrie en flux sans perméabilisation.
• Réalisez un titrage de l'anticorps pour déterminer la concentration de coloration optimale pour votre type cellulaire spécifique, car l'expression de CD116 varie selon les lignées hématopoïétiques.
• Incluez des contrôles appropriés : contrôle d'isotype, contrôle « fluorescence moins un » et lignées cellulaires dont l'expression de CD116 est connue (par exemple TF-1 ou U937) pour valider la spécificité.
• Tenez compte du fait que des différences de glycosylation entre les isoformes peuvent affecter l'accessibilité de l'épitope ou l'intensité de fluorescence ; vérifiez la performance dans la matrice d'échantillon concernée.
• Si vous l'adaptez à d'autres applications, revalidez-le complètement, car le conjugué peut influencer les propriétés de liaison biochimiques par rapport à l'anticorps non conjugué.

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