Anticorps polyclonal de lapin anti-HSP70/HSPA1A pour WB, IF/ICC, IHC-P, ELISA - P0DMV8/P0DMV9

Spécifications et paramètres fondamentaux du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de HSP70/HSPA1A

• HSPA1A (Heat Shock 70 kDa Protein 1A) est un membre canonique de la famille HSP70 des chaperonnes moléculaires, essentiel à l'homéostasie des protéines dans des conditions normales comme en situation de stress (UniProt).
• Agit comme une chaperonne dépendante de l'ATP : elle alterne entre des états liés à l'ATP (faible affinité pour les substrats) et liés à l'ADP (forte affinité pour les substrats), facilitant la liaison et la libération des substrats, les co-chaperonnes à domaine J (HSP40) stimulant l'activité ATPase et les facteurs d'échange de nucléotides (famille BAG) favorisant la libération de l'ADP. Références associées : PMID:24012426 PMID:24318877 PMID:26865365
• Régit le triage des protéines : son état d'acétylation détermine si elle favorise le repliement correct via HOPX ou la dégradation médiée par l'ubiquitine via STUB1/CHIP, maintenant ainsi l'équilibre du contrôle qualité du protéome. Références associées : PMID:27708256
• Se localise principalement dans le cytoplasme et le noyau, mais s'associe également au centrosome pendant la mitose, où elle est nécessaire à l'intégrité des pôles du fuseau et à l'assemblage d'un fuseau bipolaire. Références associées : PMID:27137183
• Régule des voies de signalisation clés : elle renforce l'ubiquitination et la dégradation de SMAD3 médiées par STUB1 (inhibant ainsi la signalisation de TGF-β) et de FOXP3 (dans les lymphocytes T régulateurs au cours de l'inflammation). Références associées : PMID:24613385 PMID:23973223
• Participe à l'élimination des facteurs de transcription mal repliés, tels que PRDM1/Blimp-1, en les retenant dans le cytoplasme et en les ciblant pour une dégradation protéasomale. Références associées : PMID:28842558
• Régule négativement l'activité transcriptionnelle de HSF1 pendant la phase de récupération de la réponse au choc thermique, contribuant ainsi à l'atténuation de la réponse au stress. Références associées : PMID:9499401
• Peut être sécrétée dans le milieu extracellulaire et, dans certains contextes pathologiques, servir de récepteur cellulaire de l'hôte pour l'entrée du rotavirus A. (SWISS-PROT)

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L'immunogène correspond à une séquence située entre les acides aminés 500 et 600 de HSPA1A humaine, une région hautement conservée chez l'humain, la souris et le rat ; une large réactivité croisée est donc attendue, mais les utilisateurs doivent valider les performances dans leur propre système d'échantillons.
• En Western blot, une bande d'environ 70 kDa est observée ; incluez toujours des contrôles positifs appropriés (par exemple, un lysat de cellules HeLa soumises à un choc thermique) et des contrôles négatifs, et envisagez d'utiliser une protéine de référence pour la normalisation.
• Pour l'immunofluorescence et l'immunohistochimie, optimisez les conditions de fixation et de perméabilisation, car HSP70 peut être présente dans les compartiments cytoplasmique et nucléaire ; une récupération antigénique peut être nécessaire pour les coupes fixées au formol et incluses en paraffine.
• Lors d'une utilisation en ELISA, assurez-vous que le tampon de revêtement et les conditions de blocage sont compatibles avec les anticorps polyclonaux afin de minimiser les liaisons non spécifiques.
• Il a été rapporté que cet anticorps pouvait être utilisé en Western blot, en immunofluorescence/immunocyt chimie, en immunohistochimie (paraffine) et en ELISA ; pour les autres applications, une optimisation supplémentaire peut être nécessaire.

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