Anticorps polyclonal de lapin anti-HSP47/SERPINH1 pour WB, IF/ICC, ELISA - P50454

Spécifications et paramètres clés du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de HSP47/SERPINH1

• HSP47, également connue sous le nom de Serpin H1, est une protéine de choc thermique de 47 kDa (colligine) appartenant à la superfamille des serpines et codée par le gène SERPINH1 chez l'homme.
• Elle fonctionne comme une chaperonne moléculaire spécifique au collagène dans le réticulum endoplasmique, essentielle pour la biosynthèse, le repliement et la trimérisation corrects du collagène.
• La protéine réside dans la lumière du réticulum endoplasmique, où elle s'associe de manière transitoire aux intermédiaires du procollagène pour empêcher l'agrégation prématurée.
• Les noms alternatifs incluent CBP1, CBP2, gp46, AsTP3, PIG14, RA-A47 et SERPINH2, reflétant sa découverte dans divers contextes cellulaires et pathologiques.
• Les modifications post-traductionnelles incluent l'acétylation, la phosphorylation et la N-glycosylation, qui peuvent réguler son activité et sa stabilité.
• L'expression de HSP47 est régulée à la hausse dans des conditions de stress (par exemple, choc thermique) et est critique pour l'homéostasie du collagène dans les tissus conjonctifs ; les mutations de SERPINH1 sont associées à l'ostéogenèse imparfaite.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène correspond aux acides aminés 139 à 418 de la HSP47/SERPINH1 humaine (NP_001226.2), exprimé sous forme de protéine de fusion recombinante. Cette région couvre une partie importante du domaine serpin, présentant probablement de multiples épitopes pour la génération d'anticorps polyclonaux.
• Dans le Western blot (WB), une bande autour de 46 kDa est attendue dans des conditions réductrices et dénaturantes. Validez la détection dans des lignées cellulaires ou des tissus pertinents exprimant le collagène (par exemple, fibroblastes, ostéoblastes). Utilisez des contrôles de chargement appropriés.
• Pour l'immunofluorescence/immunocytochimie (IF/ICC), une perméabilisation (par exemple, avec Triton X-100 ou saponine) est requise pour accéder à la lumière du RE. Attendez-vous à un motif de coloration réticulaire typique des protéines du RE. Effectuez un marquage simultané avec un marqueur du RE pour confirmation.
• Dans l'ELISA, la spécificité et le titre de l'anticorps doivent être optimisés en utilisant la HSP47 recombinante ou des lysats cellulaires. En tant que réactif polyclonal, la cohérence d'un lot à l'autre doit être vérifiée pour les dosages quantitatifs.
• La réactivité croisée avec la HSP47 de souris est confirmée ; pour d'autres espèces, l'homologie de séquence doit être vérifiée avant utilisation.

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