Anticorps monoclonal de lapin anti-HSP40 pour WB, FC, ELISA - P25685

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de HSP40/DNAJB1

• Identité de la protéine : DNAJB1 (également connu sous le nom de HSP40, Hdj1, HDJ-1) est un chaperon moléculaire humain appartenant à la famille DnaJ/HSP40, avec deux isoformes produites par épissage alternatif.
• Activité de co-chaperon HSP70 : Il se lie aux protéines HSP70 et stimule leur activité ATPasique, essentielle pour le repliement des protéines et la prévention de l'agrégation.
• Fonction d'adaptateur chaperon : Avec TTC1, il agit comme un adaptateur chaperon qui régule le repliement dépendant de HSP70 en interagissant avec la région N-terminale de HSP70 (PubMed:14503850).
  Références associées :
  PMID:14503850
• Régulation de la réponse au choc thermique : Il régule négativement l'activité transcriptionnelle de HSF1 induite par le choc thermique pendant les phases d'atténuation et de récupération, modulant la réponse cellulaire au stress (PubMed:9499401).
  Références associées :
  PMID:9499401
• Stabilisation du complexe HSC70-HIP : DNAJB1 stimule l'association entre le chaperon constitutif HSC70 et le co-chaperon HIP, améliorant le contrôle qualité des protéines.
• Hydrolyse de l'ATP et catalyse du repliement : In vitro, il stimule l'hydrolyse de l'ATP et le repliement des protéines dénaturées médié par HSPA1A/B (HSP70-1), démontrant une activité chaperonne directe (PubMed:24318877).
  Références associées :
  PMID:24318877
• Localisation subcellulaire : La protéine se trouve dans le cytoplasme, le noyau et le nucléole, passant d'un compartiment à l'autre dans des conditions normales et de stress.
• Modifications post-traductionnelles : C'est une phosphoprotéine, et son activité peut être régulée par phosphorylation ; des données protéomiques supplémentaires confirment son identité.

Guide expérimental et conseils techniques

• Conception de l'immunogène : L'anticorps a été généré contre un peptide synthétique compris entre les acides aminés 241–340 du DNAJB1 humain, une région probablement exposée dans la protéine native et conservée chez l'humain, la souris et le rat, ce qui correspond à la réactivité croisée observée.
• Western blotting (WB) : Pour le WB, utilisez des lysats cellulaires soumis à un choc thermique ou induits par un stress comme témoins positifs ; attendez-vous à des bandes proches de 27 kDa et 38 kDa (correspondant à différentes isoformes ou modifications). Optimisez la charge et les anticorps de détection en fonction de votre échantillon.
• Cytométrie en flux (intracellulaire) : Pour la FC intracellulaire, une perméabilisation et une fixation sont nécessaires pour détecter le HSP40 cytoplasmique et nucléaire ; validez la coloration avec des cellules soumises à un choc thermique par rapport à des cellules non traitées.
• Applications ELISA : Cet anticorps monoclonal peut être utilisé comme réactif de capture ou de détection dans un ELISA sandwich ; un appariement approprié avec un anticorps de détection (par exemple, un anti-HSP40 polyclonal) doit être testé.

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