Anticorps monoclonal de lapin anti-HSP27/HSPB1 [validé par KD] pour WB, IP, IF/ICC, IHC-P, ELISA - P04792

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de HSP27/HSPB1

• HSPB1 (également connue sous les noms HSP27, HSP28 et SRP27) est un membre de la famille des petites protéines de choc thermique, avec un poids moléculaire d’environ 23 kDa.
• Agit comme une chaperonne moléculaire en maintenant les protéines dénaturées dans un état compatible avec leur repliement (PubMed:10383393, PubMed:20178975). Références associées : PMID:10383393, PMID:20178975
• Joue un rôle dans la résistance au stress et l’organisation du cytosquelette d’actine, contribuant à la protection cellulaire dans des conditions de stress (PubMed:19166925). Références associées : PMID:19166925
• Par son activité de chaperonne, régule des processus biologiques, notamment la phosphorylation et le transport axonal des protéines de neurofilament (PubMed:23728742). Références associées : PMID:23728742
• Se localise dans le cytoplasme, le noyau et le cytosquelette (fuseau) en fonction du contexte cellulaire et des conditions de stress.
• Est fortement exprimée dans tous les tissus, avec les niveaux les plus élevés dans le cœur et les tissus musculaires striés et lisses.
• Les modifications post-traductionnelles comprennent la phosphorylation, l’acétylation et la méthylation, qui modulent son activité et sa fonction.
• Les mutations de HSPB1 sont associées à la maladie de Charcot-Marie-Tooth de type 2F (CMT2F) et à la neuropathie motrice héréditaire distale de type IIB (HMN2B).

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L’immunogène couvre les acides aminés 1-205 de HSP27/HSPB1 humain, correspondant à la protéine entière ; cette large couverture peut permettre de détecter plusieurs états de modification post-traductionnelle.
• Pour l’analyse par Western blot, il est recommandé d’envisager un gel SDS-PAGE à 10-12 % afin de résoudre la bande attendue de 23 kDa, et de valider la détection à l’aide de témoins positifs tels que des lysats de cellules HeLa ou MCF-7.
• L’anticorps est validé par KD, ce qui en fait un candidat pour confirmer les expériences d’inhibition de HSPB1 médiées par siRNA ou CRISPR.
• Pour les applications d’immunofluorescence, une fixation au méthanol ou au paraformaldéhyde peut être étudiée afin de trouver un équilibre entre la préservation de l’épitope et la morphologie du cytosquelette.
• Pour l’immunohistochimie, les conditions de récupération antigénique (par exemple, tampon citrate pH 6,0) peuvent nécessiter une optimisation en fonction du type de tissu et de la méthode de fixation.

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