Anticorps polyclonal anti-HP1 alpha/CBX5 pour WB, IF/ICC, ELISA - P45973

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de HP1 alpha/CBX5

• HP1 alpha (CBX5) est un composant central de l'hétérochromatine qui reconnaît et se lie aux queues de l'histone H3 méthylées au niveau de la Lys-9 (H3K9me), ce qui entraîne une répression épigénétique. Références associées : PMID:40440427
• Il est exclu de la chromatine lorsque l'histone H3 est phosphorylée au niveau de Tyr-41 (H3Y41ph), ce qui module son activité répressive. Références associées : PMID:19783980
• HP1 alpha interagit également avec l'histone H1.4 méthylée au niveau de Lys-26 (H1.4K26me), mais la liaison est interrompue par une phosphorylation simultanée au niveau de Ser-27 (H1.4S27Ph). Références associées : PMID:16127177
• Il pourrait faciliter l'association de l'hétérochromatine avec la membrane nucléaire interne par interaction avec le récepteur de la lamine B (LBR). Références associées : PMID:19783980
• HP1 alpha est essentiel pour l'assemblage du kinétochore et la formation du centromère interne, agissant via la sous-unité NSL1 du complexe MIS12. Références associées : PMID:19783980, PMID:20231385
• Au niveau sous-cellulaire, il se localise dans le noyau, avec un enrichissement au niveau des chromosomes et des centromères.
• Les modifications post-traductionnelles de HP1 alpha comprennent l'acétylation, la phosphorylation et l'ubiquitination, qui peuvent réguler son association à la chromatine et sa fonction.
• La masse moléculaire prédite de la protéine est de 22,2 kDa, ce qui correspond à la bande observée à ~22 kDa.

Conseils expérimentaux et techniques

• L'immunogène correspond aux 100 acides aminés N-terminaux de HP1 alpha humain ; pensez à réaliser un alignement de séquence pour évaluer la conservation de l'épitope entre les espèces et les isoformes.
• Pour le Western blot, une bande est attendue à environ 22 kDa ; utilisez des conditions standard de SDS-PAGE et de transfert, en optimisant la dilution de l'anticorps pour votre échantillon.
• En immunofluorescence/ICC, attendez une coloration nucléaire avec des foyers centromériques ; validez la localisation à l'aide de contre-colorations et de contrôles appropriés.
• Pour l'ELISA, titrez l'antigène de revêtement et l'anticorps de détection pour établir des rapports signal/bruit optimaux.
• La réactivité croisée a été démontrée pour les échantillons humains et murins ; pour d'autres espèces, réalisez une prédiction in silico et vérifiez-la expérimentalement.

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