Anticorps Monoclonal Lapin Anti-hnRNP K pour WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P61978

Spécifications et Paramètres Principaux du Produit

Contexte Biologique : Fonction et Localisation de hnRNP K

• hnRNP K est une protéine majeure de liaison aux pré-ARNm ayant une forte affinité pour les séquences poly(C), jouant un rôle central dans le métabolisme des hnARN, l'épissage et le traitement des ARNm.
• C'est un médiateur critique de la réponse aux dommages de l'ADN p53/TP53, fonctionnant à la fois comme coactivateur transcriptionnel (lorsqu'il est sumoylé) pour des gènes comme p21/CDKN1A et comme répresseur par des interactions avec des ARN non codants tels que lincRNA-p21, régulant ainsi l'apoptose et l'arrêt du cycle cellulaire.
• Dans le cadre d'un complexe ribonucléoprotéique contenant ZNF827, HNRNPL et circZNF827, hnRNP K régule négativement la transcription des gènes impliqués dans la différenciation neuronale (PubMed:33174841). Références connexes : PMID:33174841
• La protéine se localise dynamiquement dans plusieurs compartiments sous-cellulaires : noyau, nucléoplasme, cytoplasme et podosomes, ce qui est cohérent avec ses rôles dans le traitement de l'ARN, la signalisation et l'adhésion cellulaire.
• hnRNP K subit des modifications post-traductionnelles étendues, notamment la phosphorylation, l'acétylation, la méthylation, la sumoylation et la glycosylation, qui modulent son activité, sa localisation et ses réseaux d'interaction.
• Il possède une activité de liaison à l'ADN simple brin et est impliqué dans les interactions hôte-virus, soulignant ses contributions multifactorielles à l'homéostasie cellulaire et à la pathogenèse.
• L'épissage alternatif du pré-ARNm HNRNPK génère plusieurs isoformes, bien que leurs distinctions fonctionnelles ne soient pas entièrement caractérisées ici.
• Les mots-clés d'UniProt incluent : traitement de l'ARNm, spliceosome, régulation de la transcription, activateur, répresseur et déficience intellectuelle, soulignant ses vastes rôles régulateurs dans l'expression des gènes et la maladie.

Conseils Expérimentaux et Astuces Techniques

• L'immunogène est un peptide synthétique couvrant les acides aminés 1-100 de hnRNP K humain ; l'alignement de séquence avec les orthologues de souris et de rat montre une homologie significative, soutenant la réactivité croisée signalée. Validez la spécificité dans votre espèce cible et votre tissu.
• En Western blot (WB), une bande prédominante autour de 49-51 kDa est attendue ; cependant, en raison de modifications post-traductionnelles étendues, plusieurs bandes ou de légers décalages de masse peuvent être observés. Utilisez des marqueurs de poids moléculaire appropriés et des témoins positifs (par exemple, lysats cellulaires totaux de HeLa ou HEK293).
• Pour l'immunohistochimie (IHC-P) et l'immunofluorescence (IF/ICC), analysez les motifs de localisation sous-cellulaire : attendez-vous à un marquage nucléaire et cytoplasmique. Optimisez la récupération de l'antigène (par exemple, tampon citrate pH 6,0) et les étapes de perméabilisation. Envisagez d'utiliser des marqueurs de podosomes pour les études de colocalisation.
• Dans les applications ELISA, l'anticorps peut servir de réactif de capture ou de détection ; cependant, les conditions de l'essai (tampon de revêtement, blocage, étapes de lavage) et le couplage des anticorps doivent être déterminés empiriquement.
• Compte tenu de l'implication de hnRNP K dans la signalisation p53, l'évaluation des changements d'expression après induction de dommages à l'ADN (par exemple, par la doxorubicine ou un traitement UV) peut servir de stratégie de validation fonctionnelle.

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