Anticorps monoclonal de lapin anti-hnRNP A2B1 [validé KD] pour WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P22626

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de la hnRNP A2B1

• La ribonucléoprotéine nucléaire hétérogène A2/B1 (hnRNP A2B1) est une protéine de liaison à l’ARN qui conditionne les pré-ARNm naissants en particules hnRNP, condensant et stabilisant les transcrits afin d’éviter leur enchevêtrement et leur formation de nœuds. Références associées : PMID:19099192
• La hnRNP A2B1 reconnaît spécifiquement le motif de séquence A2RE présent sur certains ARNm, assurant leur transport vers le cytoplasme dans les oligodendrocytes et les neurones, et facilitant également le transport de l’ARN génomique du VIH-1. Références associées : PMID:10567417
• Elle agit comme un « lecteur » nucléaire de la N6-méthyladénosine (m6A), en se liant aux pri-miARN contenant de la m6A afin d’améliorer leur maturation par DGCR8, et pourrait réguler de manière similaire l’épissage des pré-ARNm. Références associées : PMID:26321680
• La hnRNP A2B1 sumoylée intervient dans le tri des miARN vers les exosomes, potentiellement par la reconnaissance des pré-miARN modifiés par la m6A. Références associées : PMID:24356509
• La protéine régule l’épissage alternatif de PKM, réprimant l’inclusion de l’exon 9 afin de favoriser l’isoforme PKM2, essentielle au métabolisme tumoral. Références associées : PMID:20010808
• Après détection de l’ADN viral nucléaire, la hnRNP A2B1 se dimérise, subit une déméthylation médiée par JMJD6 et est transloquée vers le cytoplasme pour activer la voie TBK1-IRF3, entraînant la production d’interférons. Références associées : PMID:31320558
• Elle se localise dans le noyau, le nucléoplasme et le cytoplasme, et est sécrétée via les exosomes ; ses modifications post-traductionnelles comprennent l’acétylation, la phosphorylation, la méthylation et l’ubiquitination.
• L’épissage alternatif produit plusieurs isoformes, l’isoforme B1 contenant un domaine N-terminal supplémentaire.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L’immunogène correspond à une région centrale (aa 151-250) de la hnRNP A2B1 humaine. Pour le Western blot, une bande d’environ 37 kDa est attendue dans des conditions réductrices ; toutefois, les modifications post-traductionnelles peuvent entraîner des décalages de migration.
• Pour l’immunohistochimie, effectuer une récupération antigénique (par exemple, une récupération d’épitope induite par la chaleur dans un tampon citrate) en raison de la localisation nucléaire ; utiliser des tissus positifs connus comme le cerveau ou les testicules.
• En immunofluorescence/ICC, veiller à perméabiliser les cellules avec du Triton X-100 ou un produit similaire afin de détecter les pools nucléaires et cytoplasmiques.
• L’anticorps présente une réactivité croisée avec les protéines de souris et de rat ; il convient donc aux études utilisant des modèles de rongeurs. Inclure toujours les contrôles positifs/négatifs appropriés.
• Pour l’ELISA, optimiser les concentrations de revêtement et utiliser une protéine recombinante ou des lysats cellulaires comme cibles ; une paire de capture pourrait être développée avec un autre anticorps anti-hnRNP A2B1.

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