Anticorps polyclonal anti-HNF4A pour WB et ELISA - P41235

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : fonction et localisation du facteur nucléaire hépatocytaire 4-alpha

• HNF4A, également connu sous les noms de membre 1 du sous-groupe A du récepteur nucléaire 2 (NR2A1) et de facteur de transcription 14 (TCF14), est un membre de la famille des récepteurs nucléaires qui agit comme un facteur de transcription activé par un ligand.
• Dans le foie, HNF4A contrôle l’expression des gènes hépatiques lors de la différenciation des cellules progénitrices endodermiques en cellules hépatiques en facilitant le recrutement de l’ARN polymérase II au niveau des promoteurs cibles. Références associées : PMID:30597922
• Il réprime le complexe transcriptionnel CLOCK-BMAL1 et est essentiel au maintien du rythme circadien ainsi qu’à la régulation de la période dans les cellules hépatiques et coliques. Références associées : PMID:30530698
• HNF4A se localise exclusivement dans le noyau, où il se lie à l’ADN au niveau d’éléments de réponse spécifiques.
• Les modifications post-traductionnelles, notamment l’acétylation, la phosphorylation et la conjugaison de type ubiquitination, modulent son activité transcriptionnelle et la stabilité de la protéine.
• Les mutations de HNF4A sont associées au diabète de type 1 à début précoce chez l’adulte (MODY1) et à d’autres troubles métaboliques, soulignant son rôle dans l’homéostasie du glucose.
• L’utilisation de promoteurs alternatifs et l’épissage génèrent plusieurs isoformes (par exemple HNF4a7, HNF4a8 et HNF4a9), qui peuvent exercer des fonctions spécifiques selon les tissus.
• La protéine contient des domaines conservés à doigts de zinc responsables de la liaison à l’ADN ainsi qu’un domaine de liaison aux ligands caractéristique des récepteurs nucléaires.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L’immunogène est un peptide synthétique correspondant à une séquence située entre les acides aminés 226 et 325 de HNF4A humain. En cas de ciblage de variants d’épissage spécifiques, envisagez de vérifier la réactivité vis-à-vis des isoformes.
• Pour le Western blot, le poids moléculaire prédit de la protéine est de 53 kDa. L’utilisation d’extraits nucléaires de foie humain ou de tissus/cellules du côlon peut améliorer le signal.
• Confirmez la spécificité au moyen d’expériences de knockdown ou de surexpression et incluez des contrôles positifs et négatifs appropriés.
• En ELISA, le peptide immunogène peut servir de contrôle positif ; effectuez un test avec la protéine recombinante pleine longueur afin de valider la liaison.
• Les anticorps polyclonaux peuvent présenter des variations d’un lot à l’autre ; réétalonnez votre protocole lors de l’utilisation d’un nouveau lot.

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