Anticorps monoclonal de lapin anti-HMGCS2 pour WB, IF, IHC-P, ELISA - P54868

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'HMGCS2

• L'HMGCS2 catalyse la première étape irréversible de la cétogenèse, condensant l'acétyl-CoA et l'acétoacétyl-CoA pour former le 3-hydroxy-3-méthylglutaryl-CoA (HMG-CoA). Cet HMG-CoA peut également être converti par la HMG-CoA réductase en mévalonate, reliant ainsi les voies cétogéniques et cholestérogéniques.
• L'enzyme se localise dans la matrice mitochondriale, ce qui est cohérent avec son rôle dans la production hépatique de corps cétoniques.
• L'HMGCS2 est principalement exprimée dans le foie, avec des analyses quantitatives montrant des niveaux plus de 200 fois supérieurs à ceux des autres tissus. Une faible expression est détectée dans le côlon, les reins, les testicules et le pancréas, et très faible dans le cœur et le muscle squelettique ; elle est absente dans le cerveau (PubMed:16940161, PubMed:21952825, PubMed:7893153). Il est à noter que les données de transcription indiquent une expression la plus élevée dans le cœur et le muscle squelettique, suggérant une régulation post-transcriptionnelle ou des différences d'isoformes. Références associées : PMID:16940161 PMID:21952825 PMID:7893153
• L'épissage alternatif produit plusieurs isoformes qui, avec l'acétylation et la phosphorylation post-traductionnelles, contribuent aux bandes protéiques observées à 50, 52 et 56 kDa.
• Des mutations dans HMGCS2 sont liées à des troubles métaboliques (variante pathogène), soulignant son importance clinique.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène a été conçu en utilisant un peptide de la région C-terminale (aa 400-500) de l'HMGCS2 humain, une stratégie qui peut améliorer la spécificité. Pour adapter cette approche, alignez les séquences entre les espèces si une réactivité croisée est souhaitée.
• En Western blot, observez plusieurs bandes entre 50 et 56 kDa en raison des isoformes et des modifications ; incluez des marqueurs de poids moléculaire et des contrôles positifs appropriés (par exemple, un lysat hépatique).
• Pour l'immunohistochimie (IHC-P), une récupération antigénique peut être nécessaire ; prévoyez une coloration mitochondriale. L'immunofluorescence (IF/ICC, IF-P) devrait révéler un motif mitochondrial ponctué.
• L'anticorps a été testé sur des échantillons humains, murins et de rat, ce qui le rend adapté aux études comparatives dans les modèles rongeurs de cétogenèse ou de métabolisme hépatique.
• Les applications ELISA peuvent nécessiter une optimisation des conditions de fixation et des titres d'anticorps pour l'analyte spécifique.

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