Anticorps monoclonal de lapin anti-HMGB1 (Validé KO) pour WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P09429

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la protéine du groupe à haute mobilité B1 (HMGB1)

• HMGB1 (protéine du groupe à haute mobilité B1, également connue sous le nom de HMG-1) est une protéine multifonctionnelle sensible à l'état redox qui agit comme un chaperon d'ADN dans le noyau, où elle participe à la réplication, la transcription, le remodelage de la chromatine, la recombination V(D)J, la réparation de l'ADN et la stabilité du génome. (PubMed:33147444) Références associées : PMID:33147444
• Elle fonctionne comme un motif moléculaire associé au danger (DAMP) lorsqu'elle est libérée dans l'espace extracellulaire, médiant les réponses inflammatoires et immunitaires en se liant à des récepteurs tels que RAGE, TLR2 et TLR4. (PubMed:27362237, PubMed:34743181) Références associées : PMID:27362237 PMID:34743181
• L'activité de HMGB1 est dictée par son état redox : la forme entièrement réduite agit comme une chimiokine, la forme disulfure comme une cytokine, et la forme sulfonyle favorise la tolérance immunologique. (PubMed:23446148, PubMed:23519706, PubMed:23994764) Références associées : PMID:23446148 PMID:23519706 PMID:23994764
• La localisation subcellulaire de HMGB1 est dynamique et inclut le noyau, le chromosome, le cytoplasme, la membrane cellulaire, l'endosome, le réticulum endoplasmique, et des formes sécrétées.
• Les modifications post-traductionnelles telles que l'acétylation, l'ADP-ribosylation, la phosphorylation et l'oxydation régulent la distribution subcellulaire et les activités fonctionnelles de HMGB1.
• HMGB1 est exprimée de manière ubiquitaire, avec une expression confirmée dans les plaquettes. (PubMed:11154118) Références associées : PMID:11154118
• La protéine joue un rôle dans les interactions hôte-virus, étant critique pour l'entrée du SARS-CoV-2 et du SARS-CoV, et facilitant la réplication du virus de la grippe A, de l'EBV et du virus de la dengue. (PubMed:33147444, PubMed:35239449) Références associées : PMID:33147444 PMID:35239449

Guide expérimental et conseils techniques

• L'immunogène est un peptide synthétique correspondant aux acides aminés 100–200 de l'humain HMGB1. Pensez à utiliser une protéine recombinante pleine longueur ou un épitope mapping pour confirmer la spécificité de détection.
• Pour le Western blot, HMGB1 a un poids moléculaire prédit d'environ 25 kDa ; plusieurs bandes peuvent apparaître en raison de modifications post-traductionnelles ou d'états redox.
• En IHC-P, optimisez les méthodes de démasquage antigénique et validez en utilisant des tissus avec des profils d'expression connus de HMGB1 (par exemple, amygdale, foie). Incluez des contrôles positifs et négatifs appropriés.
• En IF/ICC, notez que HMGB1 peut transiter entre le noyau et le cytoplasme selon le stress cellulaire. Traitez les cellules avec des stimuli tels que le LPS ou le TNF-α pour évaluer la translocation.
• Pour l'ELISA, assurez-vous que la paire d'anticorps est validée pour le format de test choisi ; la région épitopique (100–200) doit être accessible dans la préparation de l'antigène cible.

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