Anticorps polyclonal anti-HLA-DRB3 pour WB et ELISA - P79483

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de HLA-DRB3

• HLA-DRB3 code pour la chaîne bêta de la molécule du CMH de classe II, qui s'associe à la chaîne alpha HLA-DRA pour former un hétérodimère à la surface des cellules présentatrices d'antigènes professionnelles (CPA).
• Le complexe CMH II présente des antigènes peptidiques (généralement de 10 à 30 acides aminés issus de protéines endocytées) aux lymphocytes T CD4+, guidant les fonctions effectrices des lymphocytes T auxiliaires telles que l'immunité médiée par les anticorps et l'activation des macrophages (PubMed:16148104, PubMed:19531622, PubMed:19830726). Références associées : PMID:16148104, PMID:19531622, PMID:19830726
• Le gène possède plusieurs allèles avec des répertoires de liaison aux peptides distincts. L'ALLÈLE DRB3*01:01 présente l'épitope de la toxine tétanique et des épitopes du HHV-6B (PubMed:19830726, PubMed:2463305, PubMed:2788702, PubMed:31020640). Références associées : PMID:19830726, PMID:2463305, PMID:2788702, PMID:31020640
• L'ALLÈLE DRB3*02:02 présente des épitopes de la toxine tétanique, d'EBV, de HHV-6B, du virus de la dengue, du VIA, et des antigènes tumoraux WT1, NY-ESO-1 et TP53 (PubMed:19830726, PubMed:2788702, PubMed:23569328, PubMed:31308093, PubMed:31020640, PubMed:31333679, PubMed:22929521, PubMed:19531622, PubMed:20368442, PubMed:30282837). Références associées : PMID:19830726, PMID:2788702, PMID:23569328, PMID:31308093, PMID:31020640, PMID:31333679, PMID:22929521, PMID:19531622, PMID:20368442, PMID:30282837
• L'ALLÈLE DRB3*03:01 présente des peptides de M. tuberculosis et du VHC (PubMed:32341563, PubMed:2788702, PubMed:16148104). Références associées : PMID:32341563, PMID:2788702, PMID:16148104
• Au niveau subcellulaire, il se localise à la membrane plasmique ainsi qu'aux membranes du réticulum endoplasmique, des endosomes tardifs, des lysosomes et des autolysosomes.
• Exprimé dans les CPA professionnelles : monocytes/macrophages, cellules dendritiques et lymphocytes B.
• Les modifications post-traductionnelles comprennent la glycosylation, la formation de ponts disulfure et l'ubiquitination. Mots-clés : Immunité adaptative, CMH II, Glycoprotéine, Signal, Transmembranaire.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène couvre les acides aminés 30–227, ce qui suggère que l'anticorps peut reconnaître plusieurs épitopes du domaine extracellulaire. Valider dans des lignées de CPA pertinentes (par exemple, lymphocytes B Raji, cellules dendritiques dérivées de monocytes) pour WB et ELISA.
• Pour le WB, utiliser un SDS-PAGE réducteur et charger 20–30 µg de lysat ; le poids moléculaire prédit est d'environ 30 kDa en conditions réductrices. Optimiser le blocage avec 5% de BSA.
• Pour l'ELISA, revêtir la protéine recombinante ou le lysat cellulaire à 1–2 µg/mL ; vérifier la réactivité croisée avec les chaînes bêta HLA-DR apparentées.
• Éviter les cycles répétés de congélation-décongélation et utiliser des cocktails d'inhibiteurs de protéases frais pour maintenir l'intégrité de l'antigène.
• Associer à un anticorps secondaire approprié et envisager de titrer l'anticorps primaire (par exemple, 1:500–1:2000 pour le WB) pour minimiser le bruit de fond.

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