Anticorps polyclonal de lapin anti-HLA-DRA pour WB, IHC-P, ELISA - P01903

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de HLA-DRA

• HLA-DRA code pour la chaîne alpha de l'antigène d'histocompatibilité de classe II HLA, une glycoprotéine hétérodimérique de surface cellulaire qui s'associe à HLA-DRB pour former le complexe MHC de classe II.
• La molécule MHCII présente des peptides antigéniques extracellulaires traités (10–30 acides aminés) aux lymphocytes T auxiliaires CD4+, initiant les réponses immunitaires adaptatives telles que la production d'anticorps et l'activation des macrophages. Références associées : PMID:15265931, PMID:15322540, PMID:17334368, PMID:8145819
• HLA-DRA est exprimé sur les cellules présentatrices d'antigènes professionnelles, y compris les macrophages, les cellules dendritiques, les lymphocytes B et les cellules épithéliales thymiques, ce qui correspond à son rôle dans la surveillance immunitaire et la sélection des lymphocytes T. Références associées : PMID:15322540, PMID:23783831, PMID:31495665
• Au niveau subcellulaire, la protéine se localise à la membrane plasmique et dans les compartiments vésiculaires intracellulaires—réticulum endoplasmique, endosomes, lysosomes et autolysosomes—reflétant son trafic pour le chargement des antigènes.
• Les modifications post-traductionnelles clés comprennent la N-glycosylation, la formation de ponts disulfure et une ubiquitination potentielle, contribuant à la stabilité et au renouvellement du MHCII.
• La structure de la protéine comprend un peptide signal, des domaines extracellulaires, une hélice transmembranaire et une queue cytoplasmique ; les structures cristallines de l'hétérodimère DR ont permis de mieux comprendre la liaison des peptides.
• Dans le microenvironnement tumoral, HLA-DRA présente des peptides dérivés de la tumeur aux lymphocytes T, jouant un rôle dans l'immunité anti-tumorale. Références associées : PMID:31495665
• Le traitement autolysosomique des peptides intracellulaires par le MHCII est crucial pour la sélection thymique des lymphocytes T et la tolérance immunitaire centrale. Références associées : PMID:17182262, PMID:23783831
• La sélection des épitopes immunodominants suit deux modes : 'liaison d'abord, coupure/élagage ensuite' pour les peptides dérivés d'agents pathogènes et 'coupure d'abord, liaison ensuite' pour les autoantigènes. Références associées : PMID:25413013

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène couvre le domaine extracellulaire (aa 26–216) de HLA-DRA humain, permettant une détection potentielle des conformations protéiques dénaturées et natives dans des applications telles que WB, IHC-P et ELISA.
• Dans l'analyse par Western blot, une bande autour de 29 kDa est attendue ; cependant, une glycosylation variable peut entraîner un décalage du poids moléculaire apparent. Validez le profil des bandes dans une lignée cellulaire ou un lysat tissulaire pertinent.
• Pour l'immunohistochimie sur coupes incluses en paraffine, une optimisation de la récupération antigénique est recommandée. Les tissus témoins positifs incluent le ganglion lymphatique humain, la rate ou les amygdales.
• Une réactivité croisée avec le rat a été rapportée ; pour d'autres espèces, vérifiez l'homologie de séquence de la région immunogène avant utilisation.
• En ELISA, l'anticorps peut être utilisé pour la capture ou la détection de HLA-DRA dans des surnageants de culture cellulaire ou des lysats ; envisagez de l'associer à des anticorps secondaires appropriés et optimisez les conditions de revêtement.

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