Anticorps polyclonal de lapin anti-HLA-DRA pour WB et ELISA - P01903

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de HLA-DRA

• HLA-DRA code la chaîne alpha de la molécule du CMH de classe II HLA-DR, qui forme un hétérodimère avec la chaîne bêta (HLA-DRB) afin de présenter des antigènes peptidiques à la surface des cellules présentatrices professionnelles d’antigènes (CPA).
• L’hétérodimère HLA-DR présente des antigènes peptidiques extracellulaires (10–30 acides aminés) aux lymphocytes T CD4+ via le récepteur des lymphocytes T (TCR), orchestrant ainsi les réponses immunitaires adaptatives médiées par les lymphocytes T auxiliaires, notamment la production d’anticorps et l’activation des macrophages.
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• La liaison des peptides au CMH II se caractérise par la présence d’un large résidu d’ancrage hydrophobe en position 1 de l’extrémité N-terminale du peptide, ce qui est essentiel pour une interaction de haute affinité avec la molécule du CMH II.
  Références associées : PMID:8145819
• Dans le microenvironnement tumoral, HLA-DRA assure la présentation de peptides dérivés de tumeurs, principalement générés par les CPA résidentes de la tumeur via la phagocytose de cellules tumorales apoptotiques ou la macropinocytose de protéines tumorales sécrétées.
  Références associées : PMID:31495665
• HLA-DRA participe à la présentation dépendante de la macroautophagie des antigènes intracellulaires, un processus essentiel à la sélection des lymphocytes T dans le thymus et à la tolérance immunitaire centrale.
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• La sélection des épitopes destinés à la présentation par HLA-DR suit deux modes de traitement : « liaison d’abord, découpe/rognage ensuite » pour les antigènes dérivés d’agents pathogènes et « découpe d’abord, liaison ensuite » pour les peptides du soi.
  Références associées : PMID:25413013
• Au niveau subcellulaire, la protéine se localise dans la membrane cellulaire, le réticulum endoplasmique, les endosomes précoces et tardifs, les lysosomes et les autolysosomes, ce qui reflète son acheminement dans la voie de traitement et de présentation des antigènes.
• HLA-DRA est exprimée au niveau protéique dans les CPA professionnelles telles que les macrophages, les cellules dendritiques et les lymphocytes B, ainsi que dans les cellules épithéliales thymiques.
  Références associées : PMID:15322540 PMID:23783831 PMID:31495665
• La protéine présente des caractéristiques structurelles comprenant un peptide signal N-terminal, une région transmembranaire, des ponts disulfure, une glycosylation et une conjugaison à l’ubiquitine, soulignant sa régulation complexe et ses modifications post-traductionnelles.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L’immunogène est une protéine de fusion recombinante couvrant les acides aminés 26–216 de HLA-DRA humaine (domaine extracellulaire). Pour l’ELISA, il est recommandé d’utiliser la protéine recombinante de pleine longueur comme contrôle positif et étalon.
• Pour le Western blot, le poids moléculaire prédit est d’environ 29 kDa. Veillez à assurer un transfert complet des protéines et utilisez des marqueurs de poids moléculaire appropriés ; validez les résultats avec un échantillon positif connu (humain, souris ou rat).
• Une réactivité croisée avec la souris et le rat est rapportée ; cependant, l’homologie de séquence doit être vérifiée in silico et les performances de l’anticorps doivent être titrées et confirmées dans les lysats de tissus ou de cellules des espèces concernées.
• Cet anticorps polyclonal convient au WB et à l’ELISA ; pour des applications telles que l’immunohistochimie ou la cytométrie en flux, une validation supplémentaire peut être nécessaire.

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