Anticorps monoclonal de lapin anti-HLA-DRA pour WB, IHC-P, ELISA - P01903

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'HLA-DRA

• HLA-DRA est la chaîne alpha du CMH de classe II, également appelée antigène CMH de classe II DRA, et s'associe à la chaîne bêta HLA-DRB pour former le complexe de présentation d'antigène.
• En complexe avec HLA-DRB, il présente des peptides antigéniques sur les cellules présentatrices d'antigène professionnelles pour la reconnaissance par les lymphocytes T CD4+, guidant les fonctions effectrices des lymphocytes T auxiliaires, notamment la réponse immunitaire médiée par les anticorps et l'activation des macrophages. Références associées : PMID:15265931 PMID:15322540 PMID:17334368
• Il présente généralement des antigènes peptidiques extracellulaires de 10 à 30 acides aminés issus de la protéolyse d'antigènes endocytés dans les lysosomes. Références associées : PMID:8145819
• Dans le microenvironnement tumoral, il présente des peptides antigéniques principalement générés dans les cellules présentatrices d'antigène résidentes de la tumeur, probablement par phagocytose de cellules tumorales apoptotiques ou macropinocytose de protéines tumorales sécrétées. Références associées : PMID:31495665
• Il présente des peptides dérivés de protéines intracellulaires piégées dans les autolysosomes après macroautophagie, un mécanisme pertinent pour la sélection des lymphocytes T dans le thymus et la tolérance immune centrale. Références associées : PMID:17182262 PMID:23783831
• La sélection des épitopes immunodominants suit deux modes de traitement : « lier d'abord, couper/découper ensuite » pour les peptides dérivés de pathogènes et « couper d'abord, lier ensuite » pour les autoantigènes/peptides propres. Références associées : PMID:25413013
• Le résidu d'ancrage en position 1 de l'extrémité N-terminale du peptide, généralement un grand résidu hydrophobe, est essentiel pour une interaction de haute affinité avec les molécules de CMHII. Références associées : PMID:8145819
• HLA-DRA se localise sur la membrane cellulaire, la membrane du réticulum endoplasmique, les membranes des endosomes précoces/tardifs, la membrane du lysosome et la membrane de l'autolysosome.
• Exprimé dans les cellules présentatrices d'antigène professionnelles (macrophages, cellules dendritiques, lymphocytes B) et les cellules épithéliales thymiques. Références associées : PMID:15322540 PMID:23783831 PMID:31495665
• Glycoprotéine avec des ponts disulfures et une hélice transmembranaire ; elle subit des modifications post-traductionnelles essentielles à la stabilité et à la fonction du CMHII.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène est un peptide synthétique correspondant aux acides aminés 100-200 de l'HLA-DRA humain ; pour la validation analytique, envisagez d'utiliser une protéine recombinante entière ou des lysats cellulaires exprimant des complexes natifs de CMH de classe II.
• Pour le Western blot (WB), une bande d'environ 29 kDa est attendue en conditions réductrices ; optimisez la dilution de l'anticorps primaire et utilisez des réactifs de détection secondaires appropriés.
• Pour l'immunohistochimie (IHC-P), une récupération d'antigène peut être nécessaire, et il est conseillé de valider le profil de coloration sur des tissus témoins positifs comme le ganglion lymphatique ou la rate.
• En ELISA, assurez un revêtement optimal avec l'antigène cible et validez à l'aide d'échantillons témoins positifs et négatifs connus.
• Étant donné que cet anticorps est produit contre une séquence humaine, confirmez la réactivité croisée lorsque vous utilisez des échantillons non humains.

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