Anticorps monoclonal anti-HLA-DQA1 pour WB, IHC-P, ELISA - P01909

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de HLA-DQA1

• HLA-DQA1 code pour la chaîne alpha de la molécule HLA-DQ (classe II du CMH), un hétérodimère composé des sous-unités alpha (DQA1) et bêta (DQB1) présent sur les cellules présentatrices d'antigènes (CPA) et certaines cellules épithéliales.
• En tant que molécule classique de la classe II du CMH, l'hétérodimère DQ présente des peptides antigéniques exogènes (10–30 résidus) qui ont été internalisés via la voie endocytique aux lymphocytes T auxiliaires CD4+, jouant ainsi un rôle central dans l'immunité adaptative.
• Dans le réticulum endoplasmique, l'hétérodimère DQA1/DQB1 s'assemble avec le trimère de la chaîne invariante (CD74), formant un complexe nonamère qui est transporté vers les endosomes et lysosomes où CD74 est dégradé séquentiellement, laissant le fragment CLIP qui est échangé contre des peptides antigéniques facilité par HLA-DM.
• HLA-DQA1 est une glycoprotéine transmembranaire avec une topologie membranaire de type I typique, contenant un domaine de liaison aux peptides extracellulaire, un domaine de type immunoglobuline, une hélice transmembranaire unique et une courte queue cytoplasmique.
• Au niveau subcellulaire, la protéine transite par la membrane du RE, l'appareil de Golgi, le réseau trans-Golgien, les membranes endosomales/lysosomales, et réside finalement sur la membrane plasmique, reflétant son rôle dynamique dans le traitement et la présentation des antigènes.
• Les mots-clés d'UniProt (P01909) soulignent son implication essentielle dans l'immunité adaptative, la formation du complexe CMH II, et notent les modifications post-traductionnelles incluant la formation de ponts disulfure et la glycosylation N-liée, qui sont critiques pour sa structure et sa fonction.
• Les polymorphismes dans HLA-DQA1, seuls ou combinés avec HLA-DQB1, sont fortement associés à la maladie cœliaque (d'où l'alias CELIAC1) et d'autres troubles auto-immuns, soulignant sa pertinence clinique.
• Outre les CPA professionnelles, les molécules de la classe II du CMH sont exprimées de manière constitutive sur les cellules épithéliales gastro-intestinales, contribuant à la surveillance immunitaire locale, une caractéristique distinctive notée dans le tractus GI.

Guide expérimental et conseils techniques

• Cet anticorps monoclonal a été produit contre un peptide synthétique correspondant à une séquence interne (aa 155-254) de l'HLA-DQA1 humain, suggérant la reconnaissance d'un épitope linéaire probablement exposé dans des conditions dénaturantes, ce qui supporte son utilisation en WB.
• Pour le WB, envisagez de faire migrer des lysats cellulaires totaux ou des fractions enrichies en membranes provenant de cellules immunitaires humaines, murines ou de rat (par ex., cellules B Raji, cellules dendritiques) dans des conditions réductrices ; une bande proche de 28 kDa est attendue pour la chaîne alpha glycosylée.
• En IHC-P, une récupération antigénique peut optimiser la coloration ; testez sur des tissus humains fixés au formol et inclus en paraffine (amygdale, rate, tissu intestinal), ainsi que sur des organes lymphoïdes de souris/rat, et validez avec des contrôles négatifs appropriés.
• Les applications ELISA peuvent nécessiter une optimisation du tampon de coating et du système de détection ; envisagez d'utiliser l'anticorps dans un format ELISA sandwich avec un anticorps de détection apparié si disponible.
• Étant donné la réactivité croisée avec la souris et le rat, cet anticorps peut être utilisé dans des modèles translationnels d'auto-immunité, de transplantation ou de maladie infectieuse, mais confirmez toujours sa spécificité dans le système expérimental souhaité.

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