Anticorps polyclonal de lapin anti-HLA-DPB1 pour WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P04440

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de HLA-DPB1

• HLA-DPB1 (également connu sous le nom de DPB1, HLA-DP1B) code pour la chaîne bêta de l'antigène d'histocompatibilité DP de classe II du HLA, qui s'associe à la chaîne alpha (HLA-DPA1) pour former un hétérodimère fonctionnel du CMH de classe II à la surface des cellules présentatrices d'antigènes.
• L'hétérodimère se lie à des peptides de 10 à 30 résidus dérivés d'antigènes exogènes qui ont été internalisés et traités dans la voie endosomale/lysosomale, et les présente aux lymphocytes T auxiliaires CD4+, jouant un rôle central dans l'immunité adaptative.
• L'assemblage de la molécule du CMH de classe II se produit dans le réticulum endoplasmique avec la chaîne invariante (CD74), suivi d'un transport vers les compartiments endosomiaux où CD74 est clivée de manière protéolytique, laissant CLIP, qui est ensuite échangée contre des peptides antigéniques facilité par HLA-DM.
• La localisation subcellulaire comprend la membrane cellulaire, le réticulum endoplasmique, l'appareil de Golgi, le réseau trans-Golgien, les endosomes et les lysosomes, reflétant son trafic intracellulaire et son itinéraire de chargement des peptides.
• Les modifications post-traductionnelles comprennent la formation de ponts disulfure et la glycosylation N-liée, qui sont essentielles pour sa stabilité structurelle et sa fonction.
• En tant que molécule du CMH de classe II, HLA-DPB1 est fondamentale dans la surveillance immunitaire, la biologie de la transplantation et les associations avec les maladies auto-immunes ; elle est également exprimée dans les cellules épithéliales gastro-intestinales agissant comme CPA non professionnelles.
• La protéine a un poids moléculaire prédit d'environ 29 kDa (forme mature après clivage du peptide signal).

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène est un peptide synthétique correspondant aux résidus 40-100 de HLA-DPB1 humain ; cette région est prédite comme étant dans le domaine extracellulaire, suggérant que l'anticorps peut détecter le CMH II exprimé en surface.
• En Western blot dans des conditions réductrices, attendez-vous à une bande proche de 29 kDa ; cependant, en raison de la glycosylation et d'une éventuelle dimérisation, des bandes supplémentaires peuvent être observées ; envisagez d'utiliser un blocage approprié et une validation approfondie.
• Pour l'immunohistochimie (IHC-P) et l'immunofluorescence (IF/ICC), optimisez les méthodes de démasquage antigénique (par exemple, démasquage thermique) et la dilution de l'anticorps ; la fixation tissulaire peut affecter l'accessibilité de l'épitope.
• L'anticorps réagit de manière croisée avec la souris et le rat, indiquant des épitopes conservés ; cela peut être exploité pour des études orthologues dans des modèles rongeurs, mais la réactivité croisée doit être vérifiée expérimentalement.
• Pour l'ELISA, associez cet anticorps polyclonal avec un anticorps de capture approprié ou une cible antigénique ; testez différents tampons de coating et concentrations d'anticorps pour établir des conditions optimales.

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