Anticorps polyclonal Anti-HLA Classe 1 ABC pour WB, IHC-P, ELISA - P04439 / P01889 / P10321

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'HLA Classe 1 ABC

• La chaîne alpha de classe I du HLA (HLA-A, -B, -C) constitue la chaîne lourde de la molécule classique de classe I du complexe majeur d'histocompatibilité (CMH I). Elle s'associe de manière non covalente à la bêta-2 microglobuline (B2M) pour présenter des peptides intracellulaires traités à la surface cellulaire pour la surveillance immunitaire.
• En complexe avec la B2M, les molécules de classe I du HLA présentent principalement des peptides d'origine virale et tumorale (8-13 résidus) aux récepteurs des cellules T alpha-bêta (TCR) des cellules T CD8+, guidant les réponses cytotoxiques des cellules T spécifiques d'antigène pour éliminer les cellules infectées ou transformées. Références connexes : PMID:10449296, PMID:12138174, PMID:12393434
• De plus, les molécules de classe I du HLA présentent des peptides du soi dérivés des séquences signal de protéines sécrétées ou membranaires, contribuant à la tolérance des cellules T et à la prévention de l'auto-immunité. Références connexes : PMID:25880248, PMID:7506728, PMID:7679507
• Les allèles HLA hautement polymorphes déterminent les motifs de liaison aux peptides ; par exemple, l'HLA-A*02:01 (l'allèle le plus courant dans les populations humaines) présente des épitopes viraux immunodominants comme la protéine matricielle de l'IAV (GILGFVFTL) et le gag-pol du VIH-1 (ILKEPVHGV), caractérisés par des ancres hydrophobes aux positions 2 et au C-terminus.
• Les molécules de classe I du HLA sont des glycoprotéines membranaires intégrales localisées à la membrane cellulaire et à la membrane du réticulum endoplasmique, où le chargement des peptides et le contrôle de qualité ont lieu.
• Les modifications post-traductionnelles incluent la glycosylation, la formation de ponts disulfures, la phosphorylation et l'ubiquitination ; celles-ci régulent la stabilité, le trafic et la reconnaissance immunitaire.
• Ubiquitairement exprimées dans presque toutes les cellules nucléées, les molécules de classe I du HLA sont fondamentales pour l'homéostasie du système immunitaire et la discrimination soi/non-soi.
• Les anticorps de ce produit ciblent une région N-terminale conservée (aa 1-100) commune aux HLA-A, HLA-B et HLA-C, permettant une reconnaissance large des molécules classiques de classe I du CMH.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Conception de l'immunogène : L'immunogène correspond à un peptide synthétique couvrant les acides aminés 1-100 de l'HLA-A, -B et -C humain (basé sur NP_001229687.1). Cette région N-terminale inclut le domaine extracellulaire de liaison aux peptides, assurant une réactivité avec les trois molécules classiques de classe I du CMH. Pour une discrimination spécifique des allèles, envisagez d'utiliser des anticorps spécifiques d'allèle.
• Western blot (WB) : Dans des conditions réductrices, une bande autour de 40 kDa est attendue. Validez dans des lysats cellulaires humains appropriés (par exemple, lymphocytes, lignées cellulaires tumorales) avec des profils d'expression HLA connus.
• Immunohistochimie (IHC-P) : En raison de la nature transmembranaire de la cible, la récupération de l'antigène par chauffage (HIER) dans un tampon citrate (pH 6,0) peut améliorer la détection. Optimisez la dilution de l'anticorps en utilisant des tissus témoins positifs (par exemple, amygdales, rate) et négatifs.
• ELISA : Convient pour l'ELISA direct ou en sandwich ; associez avec des anticorps de détection reconnaissant la bêta-2 microglobuline ou des allèles HLA spécifiques. Validez avec des protéines HLA recombinantes ou des complexes naturels de classe I du CMH.

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