Anticorps monoclonal de lapin anti-HLA B7 pour WB, IF/ICC, ELISA - P01889

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de HLA-B (HLA B7)

• HLA-B est une chaîne lourde classique du CMH de classe I qui s'associe à la β2-microglobuline pour présenter des antigènes peptidiques (8-13 résidus) aux lymphocytes T CD8+, essentiels pour la surveillance immunitaire adaptative contre les virus et les tumeurs (PubMed:23209413, PubMed:25808313, PubMed:29531227, PubMed:24600035, PubMed:9620674). La présentation de peptides du soi se produit également mais induit généralement une tolérance (PubMed:18991276, PubMed:7743181). Références associées : PMID:23209413 PMID:25808313 PMID:29531227 PMID:24600035 PMID:9620674 PMID:18991276 PMID:7743181

• HLA-B est extrêmement polymorphe avec de nombreux allèles (par exemple, B07:02, B27:05) qui diffèrent par leurs motifs de liaison aux peptides, influençant les réponses immunitaires individuelles et les associations avec les maladies. Par exemple, B*07:02 favorise la Pro en position P2 et la Leu à l'extrémité C-terminale (PubMed:25808313, PubMed:29531227, PubMed:7743181). Références associées : PMID:25808313 PMID:29531227 PMID:7743181

• La localisation subcellulaire est principalement au niveau de la membrane plasmique et de la membrane du réticulum endoplasmique, ce qui est cohérent avec son rôle dans le chargement des peptides dans le RE et leur transport vers la surface cellulaire.

• C'est une glycoprotéine avec une liaison disulfure conservée, et une phosphorylation peut survenir (comme indiqué par les mots-clés : Glycoprotéine, Liaison disulfure, Phosphoprotéine). Les modifications post-traductionnelles peuvent influencer la stabilité et la présentation antigénique.

• Des allèles spécifiques présentent des épitopes viraux : B07:02 présente des épitopes du VIH-1 et du SARS-CoV-2 (PubMed:25808313, PubMed:32887977) ; B08:01 présente des épitopes d'EBV ; B*27:05 présente des épitopes du VHC, du VIH, de la grippe et du SARS-CoV-2 et confère une protection virale (PubMed:15113903, PubMed:18385228, PubMed:19139562, PubMed:32887977). Références associées : PMID:25808313 PMID:32887977 PMID:15113903 PMID:18385228 PMID:19139562

• HLA-B interagit également avec les récepteurs inhibiteurs des cellules NK comme KIR3DL1, modulant l'immunité innée de manière dépendante du peptide (PubMed:15657948, PubMed:8879234). Références associées : PMID:15657948 PMID:8879234

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène peptidique N-terminal (aa 1-100) suggère que l'anticorps peut reconnaître des épitopes linéaires dans des conformations dénaturées et natives ; envisagez de tester dans des conditions réductrices et non réductrices pour le Western blot.
• En Western blot, attendez-vous à une bande autour de 40–45 kDa, selon la glycosylation ; incluez un lysat de lymphocytes humains comme contrôle positif pour confirmer la spécificité.
• Pour l'immunofluorescence/ICC, vérifiez la localisation typique à la membrane plasmique du CMH I ; optimisez la fixation/perméabilisation pour préserver l'accessibilité de l'épitope.
• Pour l'ELISA, validez l'anticorps dans votre type d'échantillon, car l'HLA-B soluble peut être détecté dans le sérum et les surnageants de culture ; envisagez de l'associer à un anticorps de détection bien caractérisé.

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