Anticorps polyclonal de lapin anti-Histone H3 pour WB, IP, IF-P, IHC-P, ELISA - Q16695 / P68431

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'Histone H3.1t (H3.4)

• Composant central du nucléosome : L'Histone H3.1t est une variante de l'histone H3 qui agit comme un composant central du nucléosome, en enroulant et compactant l'ADN en chromatine. Cela limite l'accessibilité de l'ADN aux machineries cellulaires et joue ainsi un rôle central dans la régulation de la transcription, la réparation de l'ADN, la réplication de l'ADN et la stabilité chromosomique.
• Régulation du code histone : L'accessibilité de l'ADN est régulée par un ensemble complexe de modifications post-traductionnelles sur les histones, notamment l'acétylation, la méthylation, la phosphorylation, la citrullination, l'ADP-ribosylation, l'hydroxylation et l'ubiquitination, collectivement appelées le code histone. Ces modifications sont cruciales pour la régulation épigénétique.
• Famille de gènes et expression : Appartenant à la famille des histones H3, cette variante (codée par le gène H3-4, également connu sous le nom de HIST3H3) est spécifiquement exprimée dans les cellules testiculaires, suggérant un rôle dans la réorganisation de la chromatine pendant la spermatogenèse.
• Localisation subcellulaire : H3.1t se localise dans le noyau et les chromosomes, où elle fait partie de la particule centrale du nucléosome.
• Caractéristiques structurales : La protéine contient des domaines de liaison à l'ADN et peut être modifiée par la formation de liaisons isopeptidiques et la conjugaison de type ubiquitine, influençant la dynamique du nucléosome et la structure de la chromatine d'ordre supérieur.
• Mots-clés : Structure 3D, Acétylation, ADP-ribosylation, Chromosome, Citrullination, Liaison à l'ADN, Hydroxylation, Liaison isopeptidique, Méthylation, Cœur du nucléosome, Noyau, Phosphoprotéine, Identification protéomique, Protéome de référence, Conjugaison Ubl.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Conception de l'immunogène : L'anticorps a été généré contre un peptide synthétique correspondant à une région centrale (aa 36-136) de l'Histone H3.1t humaine. Cette région est hautement conservée parmi les variants de H3 et à travers les espèces, ce qui peut expliquer la large réactivité croisée prédite. Les chercheurs doivent valider la spécificité pour leur variant cible dans le contexte biologique pertinent.
• Western blot : Une bande spécifique d'environ 15 kDa est attendue. Pour améliorer la détection, utilisez des extraits nucléaires ou des histones extraites à l'acide, car ces fractions sont enrichies en histones. Envisagez de tester des conditions de gel dénaturantes et natives.
• Immunoprécipitation et immunofluorescence : Pour l'IP, la réticulation ou les conditions natives peuvent influencer l'accessibilité de l'anticorps en raison de la compaction de la chromatine. Pour l'IF-P, des étapes de perméabilisation (par ex. Triton X-100) sont généralement nécessaires pour détecter les histones nucléaires. Validez dans des lignées cellulaires positives et négatives.
• IHC-P et ELISA : Pour l'immunohistochimie, les méthodes de récupération antigénique (induite par la chaleur ou enzymatique) peuvent améliorer l'exposition de l'épitope. En ELISA, le peptide ou la protéine recombinante doit être utilisé pour confirmer la réactivité. Incluez toujours des témoins appropriés.

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