Anticorps monoclonal anti-histone H2B (spécifique du testicule) pour WB, IP, IHC - Q96A08

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de l’histone H2B de type 1-A

• L’histone H2B de type 1-A (H2BC1, également appelée TSH2B.1/hTSH2B) est une variante d’histone spécifique du testicule qui remplace l’histone H2B classique au cours de la spermatogenèse.
• Elle dirige spécifiquement la transformation des nucléosomes en cours de dissociation en protamine dans les cellules germinales mâles, agissant comme un facteur de dissociation des nucléosomes afin de créer une chromatine dynamique facilitant un échange massif d’histones (par homologie).
• En tant que composant central du nucléosome, elle enroule et compacte l’ADN en chromatine, jouant un rôle essentiel dans la régulation de la transcription, la réparation de l’ADN, la réplication de l’ADN et la stabilité chromosomique (par homologie).
• L’accessibilité de l’ADN est régulée par un ensemble complexe de modifications post-traductionnelles (code des histones) et par le remodelage des nucléosomes (par homologie).
• L’histone H2B de type 1-A est également exprimée dans certaines cellules adipeuses ; sa fonction et ses modifications post-traductionnelles spécifiques dans ces cellules restent incertaines (PubMed:21249133). Références associées : PMID:21249133
• La localisation subcellulaire est limitée au noyau et aux chromosomes.
• Les modifications post-traductionnelles connues comprennent l’acétylation, la méthylation, la phosphorylation, la formation de liaisons isopeptidiques et la conjugaison de type ubiquitine.
• Bien qu’elle soit principalement exprimée dans le testicule et les spermatozoïdes matures (au niveau protéique), elle est également détectée dans certaines cellules adipeuses.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L’immunogène correspond à la région N-terminale (aa 1-100) de l’histone H2B humaine de type 1-A ; par conséquent, l’anticorps détecte probablement un épitope situé dans cette région, conservée parmi les espèces prédites comme présentant une réactivité croisée.
• Pour le Western blot, prévoir une bande à environ 14 kDa ; valider dans un système d’échantillon pertinent, tel qu’un lysat de testicule humain ou d’autres tissus exprimant cette variante.
• Pour l’immunohistochimie (IHC-P) et l’immunofluorescence (IF-P), envisager des coupes de tissu testiculaire, où l’expression est la plus élevée ; une optimisation de la récupération antigénique peut être nécessaire.
• Pour l’immunoprécipitation (IP), utiliser un extrait nucléaire de testicule ou de cellules exprimant la cible ; confirmer, le cas échéant, les interactions avec les facteurs d’échange de la protamine.
• Comme cette variante d’histone est également présente dans certaines cellules adipeuses, les chercheurs peuvent détecter des bandes ou un marquage dans le tissu adipeux ou les cultures d’adipocytes ; envisager l’utilisation de témoins appropriés afin de vérifier la spécificité.

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