Anticorps polyclonal anti-Histone H1t pour WB, IHC-P, ELISA - P22492

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'Histone H1t

• Histone H1t, également appelée histone H1 testiculaire, est une histone de liaison spécifique du testicule qui se lie aux nucléosomes et favorise la compaction de la chromatine de haut niveau (probable).
• Contrairement aux autres sous-types de H1, H1t forme une chromatine moins compacte, ce qui est supposé favoriser la recombinaison homologue pendant la méiose (PubMed:26757249). Références associées : PMID:26757249
• Encodée par le gène H1-6 (anciennement HIST1H1T), H1t est classée parmi les variants d'histone H1 indépendants de la réplication qui présentent des profils d'expression spécifiques des tissus.
• Au niveau sous-cellulaire, H1t se localise dans le noyau et est associée aux chromosomes, ce qui est cohérent avec son rôle de protéine structurelle se liant à l'ADN.
• H1t subit de multiples modifications post-traductionnelles, notamment l'acétylation, la phosphorylation et la citrullination, qui peuvent réguler sa dynamique de liaison à la chromatine (Mots-clés).
• En tant que marqueur du développement et de la différenciation, l'expression de H1t est étroitement liée à la spermatogenèse, et sert d'indicateur des stades méiotiques et post-méiotiques dans le testicule.

Conseils expérimentaux et techniques

• L'immunogène utilisé est un peptide synthétique couvrant les acides aminés 150 à 207 de l'Histone H1t humaine (région C-terminale). Cette conception permet la détection de H1t pleine longueur et peut éventuellement révéler des modifications ou des isoformes spécifiques de l'extrémité C-terminale. Pour une identification sans ambiguïté des isoformes, il est recommandé d'associer cet anticorps à un anticorps spécifique de l'extrémité N-terminale.
• Pour les applications de Western blot, il est recommandé d'utiliser des extraits nucléaires de tissu testiculaire ou de lignées cellulaires connues pour exprimer H1t (par exemple les spermatocytes), associés à des contrôles de charge et des marqueurs de poids moléculaire appropriés pour confirmer la bande d'environ 22 kDa.
• En immunohistochimie sur paraffine (IHC-P), les coupes de testicule constituent des contrôles positifs idéaux du fait de l'expression spécifique de ce tissu. Les conditions de récupération d'antigène peuvent influencer la coloration : optimisez avec des tampons citrate ou EDTA standard et validez avec des tissus positifs/négatifs connus.
• Compte tenu de la réactivité croisée avec la souris et le rat, cet anticorps peut être utilisé dans des modèles de rongeurs ; cependant, un alignement de séquence de la région de l'immunogène entre les espèces est recommandé pour prédire les profils de reconnaissance.
• La performance en ELISA doit être vérifiée en immobilisant le peptide d'immunisation ou la protéine H1t recombinante et en comparant les rapports signal/bruit par rapport à des contrôles vides appropriés.

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