Anticorps polyclonal de lapin anti-HIF1AN/FIH1 [Validé KO] pour WB, IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA - Q9NWT6

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de HIF1AN

• L'inhibiteur du facteur 1-alpha induit par l'hypoxie (HIF1AN), également connu sous le nom de facteur inhibiteur HIF-1 (FIH-1) et asparagine hydroxylase du facteur induit par l'hypoxie, est une enzyme dioxygénase.
• HIF1AN hydroxyle HIF-1 alpha au niveau de l'asparagine-803 dans le domaine de transactivation C-terminal, agissant comme un capteur d'oxygène pour réguler la réponse hypoxique.
• Dans des conditions normoxiques, cette hydroxylation empêche l'interaction de HIF-1 avec des coactivateurs transcriptionnels tels que CBP/p300, réprimant ainsi l'expression des gènes induits par l'hypoxie.
• Au-delà de HIF, HIF1AN hydroxyle les résidus d'asparagine, d'aspartate et d'histidine dans les domaines à répétition ankyrine de divers substrats (par exemple, NFKB1, NOTCH1, ANK1, TNKS2), influençant ainsi de multiples voies de signalisation.
• Il régule négativement l'activité de NOTCH1, accélérant la différenciation myogénique, et régule positivement l'activité d'ASB4 pour promouvoir la différenciation vasculaire.
• HIF1AN se localise principalement dans le noyau mais se trouve également dans le cytoplasme et la région périnucléaire.
• Des mots-clés supplémentaires incluent dioxygénase, liaison au fer, liaison aux métaux, oxydoréductase et acétylation, reflétant ses propriétés catalytiques et régulatrices.

Guide expérimental et conseils techniques

• L'immunogène (aa 1-349, presque pleine longueur) peut générer des anticorps polyclonaux reconnaissant plusieurs épitopes, augmentant potentiellement la sensibilité de détection.
• Pour le Western blot, attendez-vous à une bande spécifique vers 41 kDa ; une validation par knockout (KO) est fortement recommandée pour confirmer la spécificité de l'anticorps.
• Pour l'IHC-P, optimisez la récupération antigénique (par exemple, tampon citrate pH 6.0) et validez la coloration dans des échantillons tissulaires pertinents.
• Pour l'IF/ICC, fixez les cellules avec du paraformaldéhyde et perméabilisez avec du Triton X-100 ; confirmez la coloration dans des cellules témoins positives appropriées.
• Pour l'IP, utilisez des billes d'agarose standard de protéine A/G pour les IgG de lapin ; incluez un contrôle d'isotype IgG.
• Pour l'ELISA, titre l'anticorps comme réactif de capture ou de détection et validez dans la matrice d'échantillon pertinente.
• La réactivité croisée signalée avec la souris et le rat suggère des épitopes conservés ; néanmoins, vérifiez l'alignement des séquences d'espèces pour votre application spécifique.

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