Anticorps monoclonal de lapin anti-HIF1AN/FIH-1 pour WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q9NWT6

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation du HIF1AN (Facteur inhibant le HIF-1)

• Le HIF1AN (Facteur inhibant le HIF-1), également connu sous le nom de FIH-1 ou hydroxylase à l'asparagine du facteur induit par l'hypoxie, est une dioxygénase dépendante de l'oxygène de 40,3 kDa codée par le gène HIF1AN (GeneID 55662).
• Il hydroxyle principalement la sous-unité alpha du HIF-1 au niveau de l'Asn-803 dans le domaine d'activation transcriptionnelle C-terminal (CAD) dans des conditions normoxiques, empêchant l'interaction avec des coactivateurs transcriptionnels comme CBP/p300, régulant ainsi la réponse hypoxique.
• En plus du HIF-1α, le FIH-1 hydroxyle des résidus asparagine, aspartate et histidine spécifiques au sein des domaines à répétition ankyrine (ARD) de diverses protéines, notamment NFKB1, NFKBIA, NOTCH1, ASB4 et TNKS2.
• Le FIH-1 est principalement localisé dans le noyau et le cytoplasme, avec un enrichissement dans la région périnucléaire, ce qui correspond à ses doubles rôles dans la régulation transcriptionnelle et la signalisation cytoplasmique.
• Par hydroxylation de NOTCH1, le FIH-1 régule négativement l'activité de NOTCH1, accélérant ainsi la différenciation myogénique ; à l'inverse, il régule positivement ASB4 pour promouvoir la différenciation vasculaire.
• La protéine contient des domaines de liaison du fer et catalytiques de type dioxygénase, et son activité est modulée par acétylation, soulignant son rôle de capteur clé reliant la disponibilité en oxygène aux résultats transcriptionnels.

Guide expérimental et conseils techniques

• L'immunogène couvre les acides aminés 1–349, couvrant la protéine FIH-1 de pleine longueur ; cela peut induire une reconnaissance d'épitopes de type polyclonal, soutenant une détection robuste dans de multiples applications. Pour le Western blot, une bande d'environ 41 kDa est attendue dans des conditions réductrices/dénaturantes ; envisagez d'inclure des lysats cellulaires normoxiques et hypoxiques pour évaluer l'expression endogène.
• En immunohistochimie (IHC-P) et immunofluorescence (IF/ICC), les protocoles de démasquage antigénique peuvent nécessiter une optimisation ; des tissus témoins avec une expression connue élevée de FIH-1 (par ex. rein, foie) doivent être validés parallèlement à des échantillons traités par knockout ou siRNA.
• Pour l'ELISA, il est conseillé d'utiliser un anticorps de détection ciblant un épitope distinct ; assurez-vous que les courbes standards incluent la protéine HIF1AN recombinante (pleine longueur ou fragment) pour confirmer la spécificité du test.

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