Anticorps polyclonal de lapin anti-HHLA2 pour WB, IHC-P et ELISA - Q9UM44

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de HHLA2

• HHLA2 (également connu sous les noms B7-H7, B7y et B7-H5) est un membre de la famille B7 des ligands régulateurs de la réponse immunitaire, caractérisé par un domaine d'immunoglobuline, des ponts disulfure et des motifs de glycosylation.
• Il agit comme une molécule costimulatrice sur les cellules présentatrices d'antigène, en interagissant avec TMIGD2 sur les cellules T afin d'améliorer l'activation médiée par le TCR, la prolifération et la production de cytokines via une cascade de signalisation dépendante de l'AKT.
• HHLA2 est une glycoprotéine transmembranaire de type I à passage unique, localisée à la surface cellulaire, avec un peptide signal, des domaines extracellulaires de type Ig, une hélice transmembranaire et une queue cytoplasmique.
• Il est exprimé dans divers tissus, notamment le côlon, le rein, les testicules, le poumon et le pancréas, et à des niveaux plus faibles dans l'intestin grêle, le foie et le muscle squelettique. Dans les cellules immunitaires, il est fortement exprimé dans les cellules B, les cellules dendritiques et les macrophages, mais n'est pas détecté dans les cellules T.
• La protéine subit un épissage alternatif, produisant plusieurs isoformes susceptibles de différer par leurs propriétés fonctionnelles.
• Les principales modifications post-traductionnelles comprennent la glycosylation liée à l'azote et la formation de ponts disulfure, essentielles à sa stabilité structurale et à ses interactions ligand-récepteur.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène, correspondant au domaine extracellulaire (aa 30-200), a été conçu pour générer des anticorps reconnaissant le HHLA2 natif, potentiellement adaptés à la détection de la protéine exprimée à la surface en IHC-P et de la protéine totale en WB.
• Pour le western blot, envisagez d'utiliser des conditions réductrices afin de dissocier les structures liées par des ponts disulfure ; la masse moléculaire prédite est d'environ 47 kDa, mais elle peut sembler plus élevée en raison de la glycosylation.
• Validez la spécificité de l'anticorps dans des lignées cellulaires ou des tissus humains pertinents connus pour exprimer HHLA2 (par exemple, le côlon et le rein), en utilisant des contrôles négatifs (par exemple, des cellules T) afin de confirmer l'absence de réactivité croisée.
• En ELISA, l'anticorps peut être utilisé comme réactif de capture ou de détection ; établissez expérimentalement les conditions optimales de revêtement et de blocage.

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