Anticorps polyclonal Anti-HGFAC pour WB et ELISA - Q04756

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'HGFAC

• L'HGFAC, également connu sous le nom de sérine protéase activatrice du facteur de croissance des hépatocytes, est une enzyme sécrétée qui convertit le pro-HGF inactif (HGF à chaîne unique) en HGF actif (hétérodimère lié par des ponts disulfure) par clivage protéolytique, ce qui est essentiel pour initier la signalisation du récepteur HGF/MET.
• Cette activation déclenche des cascades en aval impliquées dans la prolifération cellulaire, la motilité, la morphogenèse et l'angiogenèse, jouant un rôle central dans le développement, la régénération tissulaire et la progression du cancer.
• L'HGFAC est synthétisé sous forme de zymogène et contient plusieurs domaines conservés : un peptide signal N-terminal, un domaine de type EGF, un domaine kringle et un domaine sérine protéase C-terminal, caractéristique de la famille des facteurs de croissance apparentés au plasminogène.
• La protéine est principalement exprimée dans le foie, ce qui correspond à sa fonction critique dans la régénération et l'homéostasie hépatiques.
• Les modifications post-traductionnelles comprennent la N-glycosylation et la formation de ponts disulfure, qui sont cruciales pour le repliement correct, la stabilité et l'activité enzymatique.
• Au niveau subcellulaire, l'HGFAC est localisé dans l'espace extracellulaire après sécrétion, où il exerce sa fonction d'activateur.

Guide expérimental et conseils techniques

• L'immunogène couvre la région C-terminale (aa 408-655), qui inclut une partie du domaine sérine protéase ; tenez compte de l'emplacement de cet épitope lors de la conception d'essais nécessitant la détection des formes traitées ou non traitées.
• Pour le Western blot, une bande proche de 71 kDa est attendue (représentant le zymogène de pleine longueur ou la chaîne lourde traitée) ; validez la spécificité de la bande en utilisant des lysats de tissu hépatique ou la protéine HGFAC recombinante comme contrôles positifs.
• Dans les applications ELISA, l'anticorps peut être adapté pour capturer ou détecter l'HGFAC dans les fluides biologiques tels que le sérum ou les milieux conditionnés ; la réactivité croisée avec les orthologues de la souris et du rat doit être confirmée indépendamment dans la matrice d'échantillon pertinente.
• Étant donné que l'HGFAC est une protéase sécrétée, collectez et manipulez les échantillons dans des conditions qui préservent la stabilité des protéines et évitent la dégradation — envisagez d'utiliser des cocktails d'inhibiteurs de protéase et de maintenir les échantillons sur glace.
• L'activation de la signalisation HGF nécessite souvent à la fois l'HGFAC et son substrat pro-HGF ; les études fonctionnelles peuvent bénéficier d'une co-expression ou d'une supplémentation avec du pro-HGF recombinant.

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