Anticorps monoclonal de lapin anti-HER2/ErbB2 pour WB, IHC, IF - P04626

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de HER2/ErbB2

• La récepteur tyrosine-protéine kinase erbB-2 (également connue sous le nom de HER2, Neu, CD340) est un membre de la famille des récepteurs du facteur de croissance épidermique (EGFR) et agit comme un oncogène dans divers cancers. Elle ne possède pas de ligand direct connu mais agit comme un corécepteur pour former des complexes de signalisation actifs avec d'autres membres de la famille EGFR après liaison de la néureguline.
• HER2/ErbB2 joue un rôle crucial dans la régulation de la croissance, de la différenciation et de la survie cellulaires via des voies de signalisation en aval, notamment les cascades PI3K/AKT et RAS/RAF/MEK/ERK. Elle médie également la stabilisation des microtubules via la voie MEMO1-RHOA-DIAPH1, influençant la polarité et la migration cellulaires.
• La protéine se localise principalement sur la membrane cellulaire, mais après activation, elle peut transloquer vers le noyau, où elle agit comme un facteur de transcription. Elle se lie à des séquences promotrices spécifiques (par exemple, TCAAATTC) et régule des gènes tels que PTGS2/COX-2 et CDKN1A, stimulant la synthèse d'ARNr et la croissance cellulaire.
• La distribution subcellulaire comprend la membrane cellulaire, les membranes ondulées, les endosomes précoces, le cytoplasme, la région périnucléaire et le noyau, reflétant son trafic dynamique et ses rôles multifonctionnels.
• Les modifications post-traductionnelles comprennent la phosphorylation, la glycosylation et la formation de ponts disulfure, essentielles pour sa stabilité, sa dimérisation et son activité kinase.
• Spécificité tissulaire : Exprimée de manière élevée dans une variété de tissus tumoraux épithéliaux, y compris les tumeurs mammaires primaires, ainsi que les tumeurs de l'intestin grêle, de l'œsophage, du rein et de la cavité buccale, ce qui en fait un biomarqueur clé et une cible thérapeutique.

Guide expérimental et conseils techniques

• L'immunogène comprend le domaine extracellulaire (aa 23-652), permettant la détection de l'HER2/ErbB2 pleine longueur. Cette région est couramment ciblée par de nombreux anticorps diagnostiques et peut offrir une spécificité favorable.
• Pour le Western blot, la bande attendue est d'environ 138 kDa. Utilisez des marqueurs de poids moléculaire appropriés et validez avec une lignée cellulaire témoin positive connue pour surexprimer HER2, telle que SK-BR-3 ou BT-474.
• En immunohistochimie (IHC-P) et immunofluorescence (IF-P), des méthodes de récupération antigénique (par exemple, tampon citrate pH 6.0, induction par la chaleur) peuvent être nécessaires. Titrez l'anticorps pour optimiser le rapport signal/bruit pour votre protocole spécifique de tissu et de fixation.
• Pour l'IHC multiplex (mIHC), vérifiez la compatibilité avec d'autres anticorps primaires et systèmes de détection. En raison de son expression robuste dans certaines tumeurs, envisagez d'utiliser une série de dilutions pour éviter les interférences entre canaux.
• La réactivité de cet anticorps a été validée pour des échantillons humains ; la réactivité croisée avec d'autres espèces n'a pas été déterminée et doit être vérifiée expérimentalement si nécessaire.

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