Anticorps monoclonal anti-HER2/ErbB2 pour cytométrie en flux - P04626

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de HER2/ErbB2

• Identité protéique et isoformes : Récepteur tyrosine kinase erbB-2, également connu sous le nom de HER2, Neu, CD340 ou p185erbB2. Codé par le gène ERBB2, il fonctionne comme un récepteur de surface cellulaire essentiel dans les voies de transduction du signal qui contrôlent la croissance et la différenciation cellulaires.
• Fonction principale liée à la chromatine : Bien qu'il ne s'agisse pas directement d'une protéine de la chromatine, la signalisation de HER2 influence les programmes d'expression génique. Il est un composant essentiel des complexes neureguline-récepteur, bien que les neuregulines ne se lient pas directement à lui ; il nécessite un corécepteur pour l'interaction avec le ligand. La GP30 est un ligand potentiel.
• Régulation des microtubules : Après activation, HER2 déclenche la voie MEMO1-RHOA-DIAPH1, phosphorylant et inhibant GSK3B. Cela empêche la phosphorylation d'APC et CLASP2, permettant leur association à la membrane et la localisation ultérieure de MACF1, qui capture et stabilise les microtubules périphériques.
• Fonctions nucléaires : Il se transloque dans le noyau où il agit comme régulateur transcriptionnel. Il se lie à la séquence 5'-TCAAATTC-3' du promoteur PTGS2/COX-2 pour activer la transcription. Il participe également à la transcription CDKN1A dépendante de STAT3 et SRC et augmente la synthèse d'ARNr via l'ARN Pol I, favorisant la traduction protéique et la croissance cellulaire.
• Localisation subcellulaire : Il est présent sur la membrane cellulaire, les replis membranaires, les endosomes précoces, le cytoplasme (région périnucléaire) et le noyau. Cette distribution dynamique reflète ses rôles divers dans la signalisation proximale de la membrane et la régulation génique nucléaire.
• Spécificité tissulaire et association aux maladies : Exprimé dans divers tissus tumoraux, y compris les tumeurs mammaires primaires, et les cancers de l'intestin grêle, de l'œsophage, du rein et de la cavité buccale. L'amplification / la surexpression est une caractéristique des cancers agressifs, faisant de HER2 une cible diagnostique et thérapeutique clé.
• Principales modifications post-traductionnelles et mots-clés : Contient un peptide signal, un grand domaine extracellulaire, une hélice transmembranaire à passage unique et un domaine tyrosine kinase intracellulaire. Fortement glycosylé avec des ponts disulfures. L'autophosphorylation sur les résidus tyrosine est essentielle pour l'activité kinase. Mots-clés : liaison à l'ATP, kinase, transférase, glycoprotéine, phosphoprotéine, variant pathologique, proto-oncogène.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Cet anticorps a été obtenu contre une protéine recombinante correspondant au domaine extracellulaire (acides aminés 23‑652) de HER2 humain, ce qui le rend adapté pour détecter HER2 de surface cellulaire par cytométrie en flux (CF) sans perméabilisation. Envisagez de titrer l'anticorps pour optimiser les rapports signal/bruit pour votre modèle cellulaire spécifique.
• Pour les contrôles positifs, utilisez des lignées cellulaires surexprimant HER2 telles que SK‑BR‑3 ou BT‑474. Validez la coloration avec un contrôle d'isotype approprié pour confirmer la spécificité.
• Si la détection de HER2 intracellulaire ou total est requise, notez que la fixation et la perméabilisation peuvent altérer l'accessibilité de l'épitope. Validez l'anticorps dans vos conditions de test et envisagez une coloration sur cellules vivantes pour les cibles uniquement de surface.
• La réactivité croisée avec des espèces autres que l'humain n'a pas été testée. Si vous travaillez avec des échantillons non humains, confirmez la réactivité expérimentalement.
• Include toujours un colorant de viabilité pour exclure les cellules mortes, qui peuvent augmenter la liaison non spécifique.

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