Anticorps monoclonal anti-HER2/ErbB2 pour FC - P04626

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de HER2/ErbB2

• HER2 (Récepteur tyrosine-kinase erbB-2) est un membre de la famille des récepteurs du facteur de croissance épidermique (EGFR/ErbB), codé par le gène ERBB2. Il est également connu sous les noms de p185erbB2, CD340, HER-2/neu et proto-oncogène Neu.
• Il fonctionne comme une tyrosine kinase protéique qui forme des hétérodimères avec d'autres membres de la famille ErbB, agissant comme partenaire de dimérisation préféré. Il joue un rôle crucial dans les voies de transduction du signal régulant la croissance, la différenciation et la survie cellulaires.
• Dans le cytoplasme, HER2 régule la stabilisation et la croissance des microtubules via la voie de signalisation MEMO1-RHOA-DIAPH1, ce qui conduit à l'inhibition de GSK3B et à l'association à la membrane d'APC et de CLASP2, cruciale pour la capture des microtubules.
• Dans le noyau, HER2 fonctionne comme un régulateur transcriptionnel, se liant directement au promoteur de PTGS2/COX-2 pour activer la transcription. Il régule également l'expression de CDKN1A via STAT3 et SRC et stimule la synthèse d'ARNr par l'ARN Pol I, favorisant la synthèse protéique et la croissance cellulaire.
• La localisation subcellulaire est dynamique : principalement au niveau de la membrane cellulaire, mais également trouvé dans les endosomes précoces, le cytoplasme (région périnucléaire), le noyau et les projections cellulaires comme les ruffles.
• Exprimé dans divers tissus tumoraux, y compris les tumeurs mammaires primaires et les cancers de l'intestin grêle, de l'œsophage, du rein et de la bouche, ce qui en fait un oncogène et une cible thérapeutique critique.
• Les modifications post-traductionnelles comprennent la phosphorylation, la glycosylation et la formation de liaisons disulfure, essentielles pour son activation et sa fonction de récepteur kinase transmembranaire.

Guide expérimental et conseils techniques

• L'immunogène correspond au domaine extracellulaire (aa 23-652) de l'HER2 humain, ce qui rend cet anticorps adapté à la détection de l'HER2 exprimé en surface dans les cellules vivantes non perméabilisées par cytométrie en flux.
• Pour la coloration intracellulaire, envisagez des protocoles de perméabilisation douce pour accéder aux pools nucléaires ou cytoplasmiques d'HER2 tout en préservant l'intégrité de l'épitope.
• Titrez l'anticorps pour déterminer la concentration optimale pour les tests FC, car un excès d'anticorps peut augmenter le bruit de fond ou provoquer une agrégation.
• Incluez toujours des contrôles isotypiques appropriés et des contrôles de coloration simple pour garantir une compensation et un gating précis.
• Protégez le conjugué de la lumière et évitez les cycles de congélation-décongélation pour maintenir la stabilité du fluorophore et les performances de l'anticorps.

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