Anticorps polyclonal anti-HDAC4 pour WB, IHC-P, ELISA - P56524

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de HDAC4

• HDAC4 est une histone désacétylase de classe IIa qui réprime la transcription en éliminant les groupes acétyle des lysines N-terminales des histones centrales (H2A, H2B, H3, H4), favorisant ainsi la condensation de la chromatine.
• Par l’intermédiaire de son extension N-terminale, HDAC4 interagit avec les facteurs de transcription MEF2 (MEF2A, MEF2C, MEF2D), régulant la différenciation et l’hypertrophie musculaires.
• Dans le cancer du sein, HDAC4 participe à la répression épigénétique d’ESR1 médiée par MTA1, contribuant à la résistance aux thérapies hormonales.
• HDAC4 désacétyle HSPA1A et HSPA1B au niveau de la lysine 77, renforçant leur interaction avec le co-chaperon STUB1 et influençant le contrôle de la qualité des protéines. Références associées : PMID:27708256
• HDAC4 fait la navette entre le noyau et le cytoplasme ; sa phosphorylation par des kinases telles que CaMK favorise la liaison à 14-3-3 et sa rétention cytoplasmique, tandis que la sumoylation et l’ubiquitination régulent sa stabilité et sa localisation.
• L’enzyme est dépendante du zinc, avec un domaine catalytique conservé qui coordonne le Zn²⁺ ; les mutations perturbant la liaison aux métaux altèrent son activité.
• L’épissage alternatif de HDAC4 génère des isoformes présentant une expression tissulaire et des fonctions régulatrices distinctes.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L’immunogène couvre les résidus 451 à 650, situés dans le domaine désacétylase conservé ; cette région est identique à plus de 95 % chez l’humain, la souris et le rat, ce qui explique la large réactivité croisée.
• Pour le Western blot (WB), une bande d’environ 119 kDa est attendue ; utiliser des lysats enrichis en fractions nucléaires (par exemple HeLa, C2C12) et valider les résultats avec des contrôles positifs et négatifs appropriés.
• En immunohistochimie (IHC-P), les conditions de récupération antigénique (par exemple, tampon citrate pH 6,0) et la dilution de l’anticorps primaire doivent être optimisées ; des profils de marquage nucléaire et cytoplasmique sont tous deux possibles selon le tissu et l’état pathologique.
• Pour l’ELISA, l’anticorps peut être utilisé comme réactif de capture ou de détection ; pour les essais sandwich, il est recommandé de l’associer à un anticorps de détection anti-HDAC4 validé.
• La nature polyclonale offre une amplification robuste du signal, mais la constance entre les lots doit être vérifiée pour les applications quantitatives.

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