Anticorps polyclonal de lapin anti-HCRT pour WB, ELISA - O43612

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation d'HCRT

• HCRT code pour le précurseur des neuropeptides orexines, également appelés hypocretines, qui participent à la régulation du comportement alimentaire et du cycle veille-sommeil.
• Le précurseur prépro-orexine est traité par protéolyse pour produire deux neuropeptides actifs : l'orexine-A et l'orexine-B, qui se lient avec une forte affinité à leurs récepteurs respectifs HCRTR1 et HCRTR2.
• La signalisation de l'orexine est impliquée dans des fonctions homéostatiques plus larges, notamment le métabolisme énergétique, la régulation autonome, l'équilibre hormonal et l'homéostasie hydrique.
• HCRT est exprimé majoritairement dans le noyau sous-thalamique ; il n'est pas détectable dans d'autres régions cérébrales testées ni dans les tissus périphériques (cœur, placenta, poumon, foie, muscle squelettique, rein, pancréas).
• Au niveau sous-cellulaire, le précurseur se localise dans le réticulum endoplasmique rugueux et est sécrété via des vésicules cytoplasmiques au niveau des terminaisons synaptiques.
• Les modifications post-traductionnelles clés comprennent l'amidation, la formation de ponts disulfures et la formation d'acide pyroglutamique N-terminal, qui sont essentiels à l'activité du neuropeptide.
• Sur le plan clinique, le dysfonctionnement d'HCRT est associé à des variants pathologiques liés à la narcolepsie et à d'autres troubles du sommeil (mot-clé UniProt : Variante pathologique).

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Pour la détection par Western blot, prenez en compte le poids moléculaire prédit de 13 kDa ; validez l'anticorps dans votre système d'échantillons en utilisant des contrôles positifs appropriés issus de tissu cérébral (noyau sous-thalamique) ou de protéine recombinante.
• Compte tenu de l'expression restreinte d'HCRT, assurez-vous d'enrichir votre échantillon à partir du système nerveux central ; les tissus de cœur, de placenta, de foie ou de rein peuvent servir de contrôles négatifs, car des études ont rapporté que l'expression n'y est pas détectable.
• Pour les applications ELISA, cet anticorps peut être utilisé comme réactif de capture ou de détection ; optimisez la concentration de revêtement et les conditions de blocage de manière empirique.
• La réactivité croisée avec les orthologues de souris et de rat a été rapportée ; cependant, il est recommandé d'effectuer un alignement de séquence de la région immunogène entre espèces pour confirmer la spécificité.
• Si des bandes non spécifiques apparaissent en Western blot, envisagez des essais de pré-absorption ou de compétition peptidique pour confirmer la spécificité.

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