Anticorps polyclonal de lapin anti-Spike S2 de HCoV-OC43 pour WB et ELISA - P36334

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de la glycoprotéine Spike

• La glycoprotéine Spike (S), également désignée sous le nom de E2 ou protéine péplomérique, est une protéine virale de fusion de classe I qui recouvre la surface des virions de HCoV-OC43.
• La sous-unité S1 assure l’attachement initial aux cellules hôtes en se liant aux récepteurs contenant de l’acide sialique, un déterminant clé du tropisme viral.
• Après l’interaction avec le récepteur et l’endocytose du virus, la sous-unité S2 subit d’importants changements de conformation ; ses régions de répétitions heptadiques forment un trimère d’épingles à cheveux qui entraîne la fusion des membranes endosomales virale et cellulaire.
• Spike est synthétisée sous forme de précurseur, puis clivée protéolytiquement en S1 et S2 ; le peptide de fusion interne situé dans S2 est exposé après le clivage, permettant la fusion membranaire.
• Au cours de l’assemblage viral, la protéine se localise dans la membrane du virion, la membrane de la cellule hôte et la membrane du compartiment intermédiaire entre le réticulum endoplasmique et l’appareil de Golgi (ERGIC).
• Les modifications post-traductionnelles comprennent la glycosylation liée à l’azote, des ponts disulfure stabilisant la structure de préfusion et la palmitoylation ancrant la protéine dans la bicouche lipidique.
• En tant que facteur de virulence clé intervenant à la fois dans l’attachement et l’entrée dans les cellules hôtes, Spike constitue une cible majeure pour les anticorps neutralisants et le développement de réactifs diagnostiques.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• Le peptide immunogène se situe dans la sous-unité S2 (aa 782–881) ; par conséquent, l’anticorps devrait reconnaître à la fois Spike complète (~150 kDa) et le produit de clivage S2 dans des conditions réductrices.
• Pour le WB, envisagez d’utiliser un lysat de cellules infectées par HCoV-OC43 comme contrôle positif ; la glycosylation peut entraîner une migration de la bande à un poids moléculaire apparent plus élevé.
• En raison de sa nature polyclonale, l’anticorps peut offrir une large couverture des épitopes en ELISA ; toutefois, la réactivité croisée avec d’autres coronavirus doit être évaluée expérimentalement.
• En tant que glycoprotéine transmembranaire, Spike nécessite des détergents appropriés pour son extraction ; évitez de faire bouillir les échantillons de manière prolongée afin de prévenir leur agrégation.

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