Anticorps polyclonal de lapin contre la sous-unité S2 de la protéine Spike d'HCoV-HKU1 pour WB et ELISA - Q5MQD0

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la glycoprotéine Spike

• La glycoprotéine Spike (protéine S) d'HCoV-HKU1, également appelée E2 ou protéine peplomère, est un composant structurel clé de l'enveloppe virale. Elle existe sous forme d'homotrimère à la surface de la particule virale.
• Elle médie l'attachement du virus aux cellules hôtes par interaction avec le récepteur hôte, initiant ainsi le processus d'infection.
• La protéine S est une protéine de fusion virale de classe I qui induit la fusion entre les membranes virale et cellulaire de l'hôte par une série de changements conformationnels, notamment la formation d'une structure trismérique d'épingles à cheveux au niveau de la sous-unité S2.
• Après l'endocytose du virus, la sous-unité S2 agit comme peptide de fusion, démasqué après clivage protéolytique, pour faciliter l'entrée du virus dans le cytoplasme de l'hôte.
• La localisation subcellulaire inclut la membrane de la particule virale, la membrane du compartiment intermédiaire entre le réticulum endoplasmique et l'appareil de Golgi de l'hôte, ainsi que la membrane cellulaire de l'hôte, ce qui reflète sa voie de synthèse et de trafic intracellulaire.
• La protéine est fortement glycosylée et palmitoylée, elle contient des ponts disulfures, des régions en superhélice (coiled-coil) et une hélice transmembranaire, éléments essentiels à sa stabilité et son activité de fusion.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène est un peptide synthétique de la région S2 (aa 800-900), qui est conservé chez HCoV-HKU1 ; vérifiez la spécificité sur les souches virales concernées ou les lysats de cellules infectées.
• Pour le Western blot, le poids moléculaire prédit est d'environ 152 kDa ; envisagez l'utilisation d'un gel SDS-PAGE à faible pourcentage et d'un transfert humide sur membrane de nitrocellulose pour une détection optimale de cette grande protéine.
• Pour les applications ELISA, il peut être bénéfique d'optimiser la concentration d'antigène de revêtement et d'utiliser un tampon de blocage adapté aux antigènes viraux pour minimiser le bruit de fond.
• La réaction croisée est rapportée pour HCoV-HKU1 ; si vous testez d'autres coronavirus, validez la réaction croisée expérimentalement, car l'homologie de séquence peut varier.

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