Anticorps polyclonal de lapin anti-HCFC1 pour WB, ELISA - P51610

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de HCFC1

• HCFC1 est un corégulateur transcriptionnel qui sert de protéine d’échafaudage, médiant les interactions entre des facteurs de transcription tels que THAP11 et ZNF143 et des corégulateurs (PubMed:26416877). Références associées : PMID:26416877
• Il est essentiel à la progression du cycle cellulaire, avec des rôles fonctionnels dans la transition G1/S, comme le confirment des études utilisant des mutants et des modèles d’invalidation par extinction de l’expression (PubMed:10629049, PubMed:10779346, PubMed:15190068). Références associées : PMID:10629049 PMID:10779346 PMID:15190068
• HCFC1 relie le complexe de méthyltransférases de l’histone H3K4 Set1/Ash2 et les complexes de désacétylases des histones Sin3, intégrant l’activation et la répression transcriptionnelles (PubMed:12670868). Références associées : PMID:12670868
• Il agit comme coactivateur d’EGR2 et de GABP2 et réprime l’activation du promoteur p15(INK4b) médiée par ZBTB17, en inhibant le recrutement de p300 (PubMed:12244100, PubMed:14532282). Références associées : PMID:12244100 PMID:14532282
• En tant que composant du complexe NSL, HCFC1 contribue probablement à l’acétylation des histones nucléosomiques H4 sur des résidus de lysine spécifiques (PubMed:20018852). Références associées : PMID:20018852
• HCFC1 recrute KMT2E/MLL5 sur les promoteurs répondant à E2F1, favorisant l’activation transcriptionnelle et facilitant la transition de la phase G1 à la phase S (PubMed:23629655). Références associées : PMID:23629655
• La localisation subcellulaire comprend à la fois le cytoplasme et le noyau, ce qui concorde avec ses divers rôles régulateurs.
• La protéine est largement exprimée, avec des niveaux particulièrement élevés dans les tissus fœtaux et le rein adulte, et elle est impliquée dans les interactions hôte-virus, notamment avec la protéine VP16 du virus de l’herpès simplex.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L’immunogène correspond aux 250 acides aminés N-terminaux de HCFC1 humaine. Lors de l’utilisation de cet anticorps polyclonal, la reconnaissance de plusieurs épitopes peut produire un signal robuste, mais la cohérence entre les lots doit être confirmée pour les essais critiques.
• Pour le western blot, le poids moléculaire prédit est d’environ 209 kDa. Utiliser un gel SDS-PAGE à faible pourcentage (par exemple 6 à 8 %) et garantir un transfert efficace par électrotransfert en cuve humide avec un temps de transfert prolongé. L’inclusion d’un marqueur de poids moléculaire élevé est recommandée.
• En raison de son poids moléculaire élevé, envisager l’utilisation de lysats protéiques frais avec des inhibiteurs de protéases afin d’éviter la dégradation, et vérifier l’expression dans le tissu cible ; les lysats de rein et de tissus fœtaux peuvent servir de contrôles positifs.
• Selon les données du fournisseur, l’anticorps présente une réactivité croisée avec des échantillons de souris et de rat. Toutefois, il est conseillé d’effectuer un alignement des séquences de la région immunogène entre les espèces afin de confirmer la réactivité attendue. Réaliser la validation avec des contrôles appropriés.
• Pour les applications ELISA, optimiser l’antigène de revêtement et la concentration d’anticorps ; prendre en compte les éventuels problèmes de bruit de fond élevé liés à la nature polyclonale.

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