Anticorps polyclonal de lapin anti-Haptoglobin (HP) pour WB, IHC-P, ELISA - P00738

Spécifications et paramètres clés du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'haptoglobuline

• L'haptoglobuline est une protéine de phase aiguë qui capture l'hémoglobine libre libérée lors de l'hémolyse, formant des complexes hémoglobine-haptoglobuline rapidement éliminés par les macrophages via le récepteur d'épuration CD163, facilitant le recyclage du fer héminique et prévenant les dommages rénaux.
• Elle agit également comme un antioxydant, protégeant les tissus des dommages oxydatifs induits par l'hémoglobine libre.
• L'haptoglobuline présente une activité antibactérienne et module de nombreux aspects de la réponse de phase aiguë.
• La forme non clivée de l'allèle alpha-2, connue sous le nom de zonuline, joue un rôle dans la perméabilité intestinale en régulant le démontage des jonctions serrées, influençant l'équilibre entre tolérance et immunité vis-à-vis des antigènes non-soi.
• La protéine est principalement exprimée par le foie et sécrétée dans le plasma.
• C'est une glycoprotéine avec des domaines homologues à la sérine protéase (dépourvue d'activité catalytique) et des répétitions Sushi ; les modifications post-traductionnelles clés incluent la formation de ponts disulfure et la glycosylation.
• Plusieurs isoformes résultent de l'épissage alternatif et du polymorphisme génétique commun HP1/HP2, conduisant à une diversité structurelle et fonctionnelle.
• L'haptoglobuline mature forme des polymères liés par des ponts disulfure, et le précurseur a un poids moléculaire d'environ 45 kDa, bien que les bandes observées puissent varier en raison du traitement et de la polymérisation.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Pour le Western blot (WB), le poids moléculaire prédit est de 45 kDa ; cependant, considérez que la glycosylation et la formation de polymères peuvent entraîner des bandes de poids moléculaire plus élevé ou un motif de trainée (smear).
• Validez l'anticorps sur des échantillons de témoins positifs appropriés, tels que des lysats de tissus hépatiques humains ou du plasma, où l'haptoglobuline est abondamment exprimée.
• Pour l'immunohistochimie (IHC-P), des méthodes standard de récupération d'antigène (par exemple, tampon citrate, récupération d'épitope induite par la chaleur) peuvent être nécessaires pour une détection optimale.
• Compte tenu de la réactivité croisée signalée avec la souris et le rat, cet anticorps peut être utilisé pour des études translationnelles ; il est toutefois conseillé de confirmer la réactivité dans votre système modèle spécifique.
• Dans les applications ELISA, le couplage avec un anticorps de capture approprié peut être nécessaire ; la région de l'immunogène (acides aminés 1–100 N-terminaux) pourrait guider la sélection pour éviter le chevauchement des épitopes.

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