Anticorps Monoclonal Anti-HADHB (Lapin) pour WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P55084

Spécifications et Paramètres Principaux du Produit

Contexte Biologique : Fonction et Localisation de la Sous-unité Bêta de l'Enzyme Trifonctionnelle Mitochondriale

• HADHB (TP-bêta) code la sous-unité bêta de l'enzyme trifonctionnelle mitochondriale, un complexe hétérotétramérique qui catalyse les trois dernières étapes de la β-oxydation des acides gras à longue chaîne. La sous-unité alpha (HADHA) contribue aux activités d'hydratase d'énoyl-CoA et de déshydrogénase d'hydroxyacyl-CoA, tandis que HADHB effectue la thiolyse de la 3-cétoacyl-CoA. Références connexes : PMID:16423905, PMID:26474213, PMID:29915090
• Chaque cycle de β-oxydation retire deux carbones de la chaîne d'acyl-CoA gras, produisant de l'acétyl-CoA, du FADH₂ et du NADH. Ces transporteurs d'électrons alimentent la synthèse d'ATP via le cycle de l'acide citrique et la phosphorylation oxydative, répondant aux besoins énergétiques élevés de tissus tels que le cœur et le muscle. Références connexes : PMID:26474213, PMID:29915090
• L'enzyme trifonctionnelle agit préférentiellement sur des substrats à longue chaîne, y compris les acides gras saturés comme le palmitate et le laurate. Des preuves expérimentales confirment l'activité thiolase contre certains substrats, et son mécanisme catalytique suggère une activité sur les acides gras insaturés tels que l'oléate, le linoléate et le linolénate. Références connexes : PMID:1550553, PMID:8135828, PMID:8163672, PMID:30850536
• HADHB se localise à la membrane interne mitochondriale, à la membrane externe et au réticulum endoplasmique, indiquant un rôle dynamique dans le métabolisme des lipides à travers les sites de contact entre organites.
• Les modifications post-traductionnelles incluent l'acétylation, et l'épissage alternatif génère plusieurs isoformes. Les mutations de HADHB sont liées à une déficience de la protéine trifonctionnelle mitochondriale, un trouble métabolique grave.
• La protéine a un poids moléculaire calculé d'environ 51,3 kDa (observé ~51 kDa) et est conservée chez l'humain, la souris et le rat.

Conseils Expérimentaux et Techniques

• L'immunogène comprend les acides aminés 331–474 de HADHB humain, une région conservée chez la souris et le rat ; cela explique probablement la réactivité inter-espèces rapportée. Pour des expériences spécifiques à une espèce, confirmez l'alignement des séquences et validez la détection dans des lysats de tissus pertinents.
• Pour le Western blot, envisagez d'utiliser des fractions enrichies en mitochondries de tissus cardiaques ou hépatiques et une dilution recommandée de l'anticorps primaire entre 1:1000 et 1:5000, en optimisant selon votre type d'échantillon.
• En IHC-P, une récupération de l'antigène (par exemple, tampon citrate, pH 6,0) peut être nécessaire. Incluez un tissu de contrôle positif connu tel que le muscle cardiaque.
• Pour l'IF/ICC, un marquage conjoint avec un marqueur mitochondrial (par exemple, TOM20) est conseillé pour vérifier la localisation. Une perméabilisation au Triton X-100 ou à la digitonine peut être nécessaire.
• Lorsqu'il est utilisé en ELISA, associez-le à un anticorps de détection apparié pour les dosages en sandwich. Évaluez la réactivité croisée avec d'autres membres de la famille des thiolases si pertinent.

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