Anticorps monoclonal de lapin anti-GZMA pour WB, IP, IF/ICC, ELISA - P12544

Spécifications et paramètres clés du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la Granzyme A

• La Granzyme A (GZMA), également connue sous le nom de tryptase des CTL, fragmentine-1 et facteur de Hanoucca (HF), est une sérine protéase exprimée en abondance dans les granules cytosoliques des lymphocytes T cytotoxiques et des cellules NK.
• Après sa délivrance dans les cellules cibles via la synapse immunologique, la GZMA déclenche une pyroptose indépendante des caspases en clivant la gasdermine-B (GSDMB), libérant ainsi son domaine formateur de pores pour induire la lyse des cellules cibles (PubMed:32299851, PubMed:34022140, PubMed:36157507).
  Références associées :
  PMID:32299851 PMID:34022140 PMID:36157507
• Elle clive après les résidus Lys ou Arg (PubMed:12819770, PubMed:32299851).
  Références associées :
  PMID:12819770 PMID:32299851
• Les substrats supplémentaires comprennent l'enzyme de réparation oxydative APEX1, clivée au niveau de la Lys-31 (PubMed:12524539), et la protéine d'assemblage des nucléosomes SET, clivée au niveau de la Lys-189 pour favoriser la dégradation de l'ADN (PubMed:11555662, PubMed:12628186, PubMed:16818237).
  Références associées :
  APEX1 : PMID:12524539
  SET : PMID:11555662 PMID:12628186 PMID:16818237
• La GZMA se localise dans les granules cytoplasmiques et est sécrétée dans la synapse immunologique lors de la reconnaissance des cellules cibles.
• La protéine est une glycoprotéine contenant des ponts disulfure et est initialement synthétisée sous forme de zymogène inactif nécessitant un traitement protéolytique pour son activation.

Guide expérimental et conseils techniques

• Pour le western blot, attendez-vous à une bande d'environ 29 kDa dans des conditions réductrices ; validez dans des lignées cellulaires humaines pertinentes telles que les lymphocytes T cytotoxiques ou les cellules NK.
• Lors de la réalisation d'une immunofluorescence ou d'une immunocytochimie, envisagez une perméabilisation pour visualiser la coloration granulaire cytoplasmique.
• Pour l'immunoprécipitation et l'ELISA, optimisez la dilution de l'anticorps dans votre matrice d'échantillon spécifique.
• Assurez-vous d'utiliser des témoins positifs et négatifs appropriés (par exemple, lignées cellulaires exprimant la GZMA vs lignées knock-out) pour confirmer la spécificité.

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