Anticorps monoclonal anti-Guanylyl Cyclase bêta 1 (GUCY1B3) pour WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q02153

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la Guanylyl Cyclase bêta 1

• La sous-unité bêta-1 de la guanylate cyclase soluble (GUCY1B3) est le produit protéique du gène GUCY1B1 ; elle est également connue sous le nom de GCS-bêta-3, sous-unité petite de la guanylate cyclase soluble, et Guanylyl Cyclase bêta 1.
• Cette sous-unité forme un hétérodimère avec une sous-unité alpha pour constituer la guanylate cyclase soluble, le récepteur principal de l'oxyde nitrique (NO). Après liaison du NO, l'enzyme catalyse la conversion du GTP en GMPc, un second messager clé médiant la vasodilatation, la neurotransmission et d'autres processus physiologiques.
• GUCY1B3 est un membre de la famille des adénylyl cyclase-4/guanylyl cyclase et contient un domaine de liaison à l'hème qui détecte le NO, une région GTPase centrale et un domaine catalytique de cyclase.
• Au niveau subcellulaire, la protéine se localise principalement dans le cytoplasme, ce qui correspond à son rôle d'enzyme soluble.
• Les données de spécificité tissulaire indiquent une expression dans le cerveau, en particulier dans le cortex et le cervelet, où la signalisation oxyde nitrique-GMPc régule la plasticité synaptique et la fonction neuronale.
• Bien que la fiche UniProt mentionne l'épissage alternatif comme mot-clé, aucun isoforme spécifique n'est décrit pour cette sous-unité au-delà de la séquence canonique.
• Les mots-clés associés à GUCY1B3 incluent structure-3D, biosynthèse du GMPc, cytoplasme, hème, fer, liaison aux métaux et liaison au GTP, reflétant ses propriétés enzymatiques et régulatrices.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène est constitué d'un peptide synthétique couvrant la région N-terminale (acides aminés 1–100), suggérant la détection de GUCY1B3 pleine longueur ; vérifier la spécificité avec des contrôles appropriés.
• Pour le Western blot, la bande cible est attendue à environ 71 kDa (poids moléculaire canonique ~70,5 kDa) ; envisager d'utiliser des conditions réductrices et non réductrices pour évaluer d'éventuels artefacts de dimérisation.
• En IHC-P, optimiser les protocoles de démasquage antigénique et valider les profils de marquage dans des tissus positifs tels que le cortex cérébral et le cervelet, qui expriment GUCY1B3 à des niveaux détectables.
• Les expériences IF/ICC devraient donner un signal cytoplasmique ; des études de co-localisation avec des marqueurs d'organites peuvent aider à confirmer la distribution subcellulaire.
• Les applications ELISA peuvent utiliser cet anticorps comme réactif de capture ou de détection ; l'associer avec un anticorps anti-sous-unité alpha ou anti-GUCY1B3 provenant d'un hôte différent pour des tests en sandwich.
• Étant donné la réactivité croisée avec la souris et le rat, cet anticorps est adapté aux études dans les modèles rongeurs courants ; cependant, valider les performances dans le tissu ou la lignée cellulaire de chaque espèce en raison de variations potentielles de séquence.
• Comme l'activité de la guanylate cyclase soluble dépend de l'hème et du NO, considérer si vos conditions expérimentales (par exemple, stimulation cellulaire avec des donneurs de NO) pourraient affecter l'accessibilité de l'épitope ou la conformation de la protéine.

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