Anticorps polyclonal de lapin anti-GTPBP4 pour WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q9BZE4

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de GTPBP4

• GTPBP4, également connue sous le nom de protéine nucléolaire liant le GTP 1 (NOG1), protéine du gène de l'insuffisance rénale chronique (CRFG) et protéine liant le GTP NGB, est un membre de la famille des protéines liant le GTP.
• Fonctionne comme une GTPase dans la biogenèse de la sous-unité ribosomique 60S, essentielle pour l'assemblage du ribosome et la traduction (PubMed:32669547). Références associées : PMID:32669547
• Agit comme un répresseur de la protéine tumorale TP53, empêchant sa stabilisation et inhibant ainsi l'arrêt du cycle cellulaire (PubMed:20308539). Références associées : PMID:20308539
• Se localise principalement dans le nucléole, site de la biogenèse des ribosomes.
• Les modifications post-traductionnelles comprennent l'acétylation, la phosphorylation et la formation de liaisons isopeptidiques (conjugaison de type ubiquitine), qui peuvent réguler son activité et sa stabilité.
• La protéine contient des domaines de liaison au GTP et aux nucléotides, la classant comme une GTPase nucléolaire.
• L'épissage alternatif du gène GTPBP4 produit de multiples isoformes, bien que les fonctions spécifiques des isoformes ne soient pas entièrement caractérisées.

Guide expérimental et conseils techniques

• L'immunogène est une protéine de fusion recombinante correspondant aux acides aminés 385-634 du GTPBP4 humain, couvrant la région C-terminale. Cette région présente une homologie avec la souris et le rat, ce qui contribue probablement à la réactivité croisée observée.
• Pour le Western blot (WB), le poids moléculaire prédit est de 74 kDa ; utilisez un pourcentage de gel approprié et des contrôles de charge. Validez l'anticorps avec un lysat témoin positif.
• En immunohistochimie (IHC-P), envisagez d'optimiser les méthodes de récupération antigénique (par exemple, récupération d'épitopes induite par la chaleur) et incluez un contrôle sans anticorps primaire pour évaluer la coloration de fond.
• Pour l'immunofluorescence (IF/ICC), comme GTPBP4 est nucléolaire, une perméabilisation avec des détergents comme le Triton X-100 est recommandée pour accéder au compartiment nucléaire. Confirmez la localisation avec un marqueur nucléaire.
• Les tests ELISA et autres immunoessais peuvent nécessiter une titration de l'anticorps et des tampons de blocage optimisés pour les anticorps polyclonaux afin de réduire la liaison non spécifique.
• La réactivité croisée avec la souris et le rat doit être confirmée dans le tissu ou la lignée cellulaire pertinent(e) avec des témoins positifs et négatifs spécifiques à l'espèce.

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