Anticorps monoclonal anti-GSK3β pour cytométrie en flux (intracellulaire) - P49841

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de GSK3β

• GSK3β est une sérine/thréonine kinase constitutivement active qui agit comme régulateur négatif dans le contrôle hormonal de l'homéostasie glucidique, la signalisation Wnt et la régulation des facteurs de transcription et des microtubules, en phosphorylant des substrats comme la glycogène synthase, la β-caténine et Tau. Références associées : PMID:11430833 PMID:12554650 PMID:14690523
• Elle nécessite une phosphorylation d'amorçage de la plupart de ses substrats ; dans le muscle squelettique, elle phosphoryle et inhibe la glycogène synthase (GYS1), régulant la synthèse du glycogène et contribuant potentiellement à la résistance à l'insuline. Références associées : PMID:8397507 PMID:11430833 PMID:16484495
• Dans la signalisation Wnt, GSK3β forme un complexe avec APC, AXIN1 et β-caténine, et phosphoryle la β-caténine pour promouvoir sa dégradation médiée par l'ubiquitine. Références associées : PMID:12554650
• GSK3β phosphoryle Tau (MAPT) sur la Thr-548, réduisant sa liaison aux microtubules ; Tau est un composant majeur des enchevêtrements neurofibrillaires dans la maladie d'Alzheimer, et GSK3β colocalise avec Tau et PKR dans le cerveau des patients atteints d'Alzheimer. Références associées : PMID:14690523
• Elle régule l'horloge circadienne en phosphorylant les protéines horlogères centrales BMAL1, CLOCK et PER2, les ciblant pour une dégradation protéasomique. Références associées : PMID:19946213 PMID:28903391
• GSK3β se localise dans le cytoplasme, le noyau et la membrane cellulaire ; elle est fortement exprimée dans le testicule, le thymus, la prostate et l'ovaire, et faiblement dans le poumon, le cerveau et le rein. Le gène est soumis à un épissage alternatif, et la protéine est modifiée par phosphorylation, ADP-ribosylation et palmitoylation.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Cet anticorps cible un épitope intracellulaire ; la fixation et la perméabilisation sont requises pour la cytométrie en flux intracellulaire. Optimisez les conditions de perméabilisation pour votre type cellulaire.
• Validez l'expression de GSK3β dans les lignées cellulaires concernées (par ex. HEK293, HeLa) à l'aide de contrôles positifs et négatifs pour confirmer la spécificité du marquage.
• Utilisez des contrôles d'isotype appropriés et titrez l'anticorps conjugué pour minimiser le bruit de fond et optimiser le rapport signal sur bruit.
• L'immunogène couvrant la région 321-420 proche de l'extrémité C-terminale, assurez-vous que l'accessibilité de l'épitope n'est pas masquée par des interactions ou des modifications protéiques.
• Vérifiez les paramètres de compensation si vous utilisez l'dans des panneaux multicolores ; référez-vous aux guides de recouvrement spectral des colorants.
• Aucune donnée de réactivité croisée n'est fournie ; vérifiez la compatibilité avec l'espèce ou la lignée cellulaire cible qui vous intéresse.

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