Anticorps monoclonal anti-GSK-3α/β pour WB, IF/ICC, IF-P, IHC-P, ELISA - P49840/P49841

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la GSK-3α/β

• La GSK-3α et la GSK-3β sont des sérine/thréonine kinases constitutivement actives qui phosphorylent et inactivent la glycogène synthase (GYS1/GYS2), régulant ainsi négativement la synthèse du glycogène et l'homéostasie du glucose.
  Références associées : PMID:11749387, PMID:17478001, PMID:19366350
• Elles jouent un rôle central dans la voie de signalisation Wnt/β-caténine en phosphorylant la β-caténine (CTNNB1), favorisant son ubiquitination et sa dégradation par le protéasome, ce qui inhibe la transcription des gènes cibles de Wnt.
  Références associées : PMID:17229088
• La GSK-3α contribue à la pathogenèse de la maladie d'Alzheimer en facilitant le traitement de la protéine précurseur de l'amyloïde (APP) et la génération de plaques amyloïdes neurotoxiques.
  Références associées : PMID:12761548
• Ces kinases sont impliquées dans la signalisation de l'insuline : elles peuvent médier le développement de la résistance à l'insuline en régulant des facteurs de transcription qui contrôlent les gènes métaboliques.
  Références associées : PMID:10868943, PMID:17478001
• La GSK-3α régule l'autophagie en phosphorylant l'acétyltransférase KAT5/TIP60 dans des conditions de carence, qui à son tour acétyle et active des protéines clés de l'autophagie comme ULK1 et RUBCNL.
  Références associées : PMID:30704899
• Les deux isoformes possèdent un domaine kinase N-terminal avec des sites de liaison à l'ATP et aux nucléotides, et leur activité est modulée par des kinases en amont via la phosphorylation de résidus sérine N‑terminaux spécifiques (Ser21 pour GSK-3α, Ser9 pour GSK-3β). Une dysrégulation est associée au diabète, aux maladies neurodégénératives et au cancer.

Guide expérimental et conseils techniques

• Pour le transfert Western (WB), attendez-vous à des bandes d'environ 46 kDa (GSK-3α) et 48 kDa (GSK-3β) dans des lysats cellulaires ou tissulaires d'origine humaine, murine ou rat. Utilisez un SDS-PAGE standard et des membranes de nitrocellulose/PVDF.
• En immunofluorescence (IF/ICC) et en immunohistochimie (IHC), perméabilisez les cellules ou déparaffinez et effectuez une récupération antigénique sur les tissus de manière appropriée, car la GSK-3α/β est principalement cytoplasmique mais peut également se localiser dans les noyaux. Validez la spécificité du signal avec des contrôles positifs et négatifs connus.
• Pour l'ELISA, envisagez un format sandwich utilisant cet anticorps de capture associé à un anticorps de détection reconnaissant un épitope différent. Titrez les concentrations d'anticorps pour optimiser le rapport signal/bruit.
• L'immunogène étant une protéine recombinante, l'anticorps peut reconnaître à la fois les formes phosphorylées et non phosphorylées. Vérifiez la reconnaissance de l'état de modification souhaité en traitant les échantillons avec des modulateurs (par exemple, insuline ou Wnt3a pour induire la phosphorylation, ou inhibiteurs de phosphatases pour préserver les états endogènes).
• Une réactivité croisée avec les orthologues de souris et de rat est rapportée ; cependant, confirmez toujours la réactivité dans votre système modèle spécifique, car les niveaux d'expression et les modifications post-traductionnelles peuvent varier.

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